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一个二化性家蚕醛酮还原酶基因的克隆及序列与表达分析(英文)

文献类型： 中文期刊

作者： 陈艳荣 1 ; 朱娟 2 ; 蒋涛 3 ; 谭志承; 陈艳花; 唐顺明; 沈兴家;

作者机构： 1.江苏科技大学生物技术学院江苏省蚕桑生物学与生物技术重点实验室

2.黄山学院生命与环境科学学院

3.中国农业科学院蚕业研究所农业农村部蚕桑遗传改良重点实验室

关键词： 醛酮还原酶;滞育准备;家蚕;表达

期刊名称： 蚕业科学

ISSN： 0257-4799

年卷期： 2019 年 2 期

页码： 187-194

摘要： 醛酮还原酶(aldo-keto reductase,AKR)超级家族成员以还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸作为其辅酶,将醛酮类化合物还原成相应的醇类,其作用底物范围广泛,包括糖类、脂肪醛和甾体类激素等,在许多重要生物学反应中发挥关键作用.以二化性家蚕品系秋丰为材料,利用RT-PCR分别从滞育命运组和非滞育命运组克隆出AKR蛋白的cDNA序列.AKR蛋白序列由343个氨基酸组成,与黑腹果蝇和人的AKR分别有43%和38%的序列一致性.基于蛋白质序列构建的系统发育树显示,家蚕AKR蛋白属于AKR2E亚家族,其氨基酸序列与该家族成员序列一致性超过30%,故命名为AKR2E-like.将akr2e-like基因的cDNA序列克隆进表达载体pET-28a(+)中进行原核重组表达,SDS-PAGE电泳和Western blot分析显示重组蛋白被成功表达.qRT-PCR分析表明,ark2e-like基因表达受发育环境调节:在滞育诱导条件下,该基因在家蚕化蛹早期的表达量持续增加,在化蛹后第4天mRNA丰度达到最高值;而在非滞育诱导条件下,化蛹后ark2e-like基因表达量并无明显波动.上述结果表明,ark2e-like基因有可能在家蚕二化性品系的滞育准备期起关键作用.

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