文献类型： 中文期刊

作者： 刘佳 ¹ ; 宋洁 ² ; 李帅 ² ; 王尚辉 ² ; 李江南 ² ; 王春凤 ¹ ; 翁长江 ² ; 曾艳 ¹ ;

作者机构： 1.吉林农业大学动物医学学院

2.中国农业科学院哈尔滨兽医研究所动物疫病防控全国重点实验室

关键词： 猪源GSDMD;多克隆抗体;效价;初步应用

期刊名称： 中国兽医科学

ISSN： 1673-4696

年卷期： 2024 年 007 期

页码： 968-973

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为制备猪源GSDMD多克隆抗体，构建了重组表达质粒pET-21a-nGSDMD，成功表达并纯化了重组nGSDMD蛋白。将纯化的重组蛋白免疫新西兰大白兔制备nGSDMD多克隆抗体（pAb），经ELISA检测，抗体效价为1∶64 000。Western-blot和IFA显示该抗体能特异性识别HEK293T细胞中瞬时表达的Flag-GSDMD蛋白和PRRSV感染肺泡巨噬细胞（PAMs）后表达的GSDMD蛋白。该多克隆抗体特异性良好，无交叉反应，能识别检测病毒感染条件下GSDMD切割片段，可用于PRV和PRRSV诱导的细胞焦亡检测。综上，本研究为探究GSDMD蛋白提供了良好的工具，为深入探究GSDMD蛋白的生物学功能奠定了基础。