文献类型: 中文期刊
作者: 武刚 1 ; 王洪梅 1 ; 刘晓 1 ; 王立群 1 ; 于力 1 ; 仲跻峰 1 ; 何洪彬 1 ;
作者机构: 1.山东省农业科学院奶牛研究中心;东北农业大学生命科学院;中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
关键词: Asia1型口蹄疫病毒;P1基因;原核表达;抗血清
期刊名称: Agricultural Science & Technology
ISSN: 1009-4229
年卷期: 2010 年 Z1 期
页码: 112-114+143
摘要: [目的]研究Asial型口蹄疫病毒P1基因原核表达及其抗血清的制备。[方法]利用基因克隆技术获得Asia1型口蹄疫病毒(FMDV)的P1基因,然后将P1基因重组到pET-32a(+)质粒中;转化大肠杆菌BL21感受态细胞,经IPTG诱导及蛋白纯化后,进行SDS-PAGE;将重组菌BL21培养物用超声波裂解,对该融合蛋白进行分离纯化后免疫新西兰兔,制备P1蛋白抗血清。[结果]获得了重组性阳性克隆;SDS-PAGE结果表明在105kD处出现了目的条带;Western-blot分析表明,抗血清可与原核表达的P1蛋白特异性结合,ELISA方法检测抗血清的效价可达到1∶5120。[结论]该研究结果为建立FMDV的血清学诊断方法及其基因工程疫苗的研究奠定了基础。
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