文献类型： 中文期刊
作者： 刘冉 1 ; 陈福广 1 ; 陈平 1 ; 黄萌萌 1 ; 朱金鲁 1 ; 谢芳 1 ; 孟庆文 1 ; 刘思国 1 ; 刘建华 1 ; 张跃灵 1 ;
作者机构： 1.新疆农业大学动物医学院;中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室
关键词： 猪链球菌;信息肽诱导;Cre/LoxP系统;基因缺失
期刊名称： 中国预防兽医学报
ISSN： 1008-0589
年卷期： 2019 年 02 期
页码： 125-130
收录情况： 北大核心 ; CSCD
摘要： 为建立一种高效的猪链球菌(Streptococcus suis)基因缺失方法,本研究利用信息肽诱导DNA片段转化和Cre/LoxP系统去除抗性基因这两种技术,通过在S.suis 05ZYH33的ssu05_1921基因上、下游片段和壮观霉素抗性基因(spc)片段之间引入LoxP位点,采用信息肽GE9诱导构建的DNA片段转化S.suis并发生重组,经抗性筛选快速获得spc替代ssu05_1921基因的缺失株;进一步引入pSET6s/P_(tufA-cre)质粒表达Cre重组酶作用于LoxP位点,去除spc基因,产生无痕ssu05_1921基因缺失株,经测序和RT-PCR验证缺失正确。本研究建立的该方法简单、快捷、阳性率高,为构建S.suis基因缺失株、研究S.suis致病机制提供了新的选择。
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