文献类型： 中文期刊

作者： 刘翔 ¹ ; 尹灵丹 ¹ ; 薛美 ¹ ; 李亮 ¹ ; 赵立媛 ¹ ; 蒋成凡 ¹ ; 王文哲 ¹ ; 冯力 ¹ ; 刘平黄 ² ;

作者机构： 1.中国农业科学院哈尔滨兽医研究所

2.中国农业大学动物医学院

关键词： 启动子质粒;双荧光素酶;NLR家族含CARD结构域5（NLRC5）基因;启动子调控元件;转录因子结合位点;生物信息学

期刊名称： 黑龙江畜牧兽医

ISSN：

年卷期： 2021 年 013 期

页码： 1-5,143

收录情况： 北大核心

摘要： 为了构建猪NLR家族含CARD结构域5 （NOD-like receptor family caspase recruitment domain family domain-containing 5,NLRC5）基因启动子双荧光素酶报告质粒,确认其活性,进而探索其转录调控机制,试验采用PCR方法从猪睾丸细胞（swine testicular cell, ST细胞）中扩增出猪NLRC5基因启动子,将其与pGL3-Basic载体连接,测序正确后将猪NLRC5基因启动子双荧光素酶报告质粒转染至ST细胞中,通过双荧光素酶报告检测试剂盒检测荧光素酶的表达活性,并使用生物信息学软件预测该基因启动子区域的CpG岛、调控元件及转录因子结合位点。结果表明:试验成功构建猪NLRC5基因启动子双荧光素酶报告质粒,该质粒的相对荧光素酶活性极显著高于pGL3-Basic载体（P<0.01）。NLRC5基因启动子区域中存在2个CpG岛,TATA box、CCAAT box和GC box等多种调控元件,以及IRF1、IRF3、STAT1、STAT3、STAT4和NF-κB转录因子结合位点。说明猪NLRC5基因的表达可能受甲基化的影响,同时也可能受顺式作用元件以及干扰素和NF-κB相关转录因子的调控。