文献类型： 中文期刊

作者： 张心雨 ¹ ; 吴红霞 ² ; 李永锋 ² ; 孙元 ² ; 付强 ¹ ; 仇华吉 ¹ ;

作者机构： 1.佛山科学技术学院生命科学与工程学院

2.兽医生物技术国家重点实验室

关键词： 伪狂犬病病毒;UL35基因;SYBR Green Ⅰ;定量PCR

期刊名称： 中国兽医学报

ISSN： 1005-4545

年卷期： 2024 年 44 卷 011 期

页码： 2334-2340

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 对伪狂犬病病毒(pseudorabies virus, PRV)感染后不同时间点UL35和gB基因的进行定量分析，发现在感染细胞后2.5、5.0以及20.0 h时，两者基因组拷贝数具有显著差异，并且在PRV感染早期可以观察到UL35基因的表达。为了确定UL35基因能否作为诊断PRV感染的靶标，本研究根据PRV不同毒株UL35基因保守序列，设计合成特异性荧光定量PCR引物，扩增长度为54 bp的片段。通过优化反应条件和反应体系，结果显示，建立的PRV SYBR GreenⅠ荧光定量PCR检测方法具有良好的重复性和特异性，其标准曲线与模板浓度呈现良好的线性关系；对猪繁殖和呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus, PRRSV)、猪瘟病毒(classical swine fever virus, CSFV)、非洲猪瘟病毒(African swine fever virus, ASFV)核酸扩增均呈阴性；将所建立的方法与同类方法进行比较，敏感性无差异；组间和组内重复性试验的变异系数小于2%。用本试验所建立的方法对PRV感染小鼠的组织样品进行检测，均检测到一定的病毒载量。结果表明，UL35基因可以作为诊断PRV感染的靶标。