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伪狂犬病病毒在小鼠原代神经细胞中潜伏感染模型的建立

文献类型: 中文期刊

作者: 向广韬 1 ; 吴红霞 1 ; 王异民 1 ; 周末 1 ; 王亚林 1 ; 王翌 1 ; 尹航 1 ; 仇华吉 1 ; 孙元 1 ;

作者机构: 1.中国农业科学院哈尔滨兽医研究所动物疫病防控全国重点实验室

关键词: 伪狂犬病毒;小鼠背根神经节;潜伏感染;再激活;模型

期刊名称: 中国预防兽医学报

ISSN: 1008-0589

年卷期: 2024 年 001 期

页码: 1-6,15

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 缺少PRV良好的潜伏感染模型已成为研究其潜伏感染机制的障碍。为建立PRV潜伏感染的体外细胞模型,本研究通过分离新生鼠背根神经节(DRG)获取神经细胞,并利用间接免疫荧光试验(IFA)对其进行鉴定,获得了DRG中的神经细胞。采用重组报告病毒r PRV-EGFP感染神经细胞,同时添加阿昔洛韦(ACV)抑制病毒复制以建立潜伏感染,并采用棋盘法对病毒感染剂量和ACV浓度进行优化,结果显示,感染复数(MOI)为0.001,ACV浓度为0.5 mmol/L,病毒能够在神经细胞中稳定建立潜伏感染。采用荧光定量RT-PCR、病毒滴度测定、药物刺激再激活的方法对潜伏感染模型鉴定,结果显示,潜伏感染时病毒不能复制,且不产生感染性病毒粒子;而经LY294002 (PI3K抑制剂)诱导病毒再激活后,病毒大量复制并产生感染性病毒粒子。本研究首次利用小鼠原代神经细胞建立了PRV的潜伏感染模型,该模型的建立为PRV潜伏感染机制的研究奠定了基础。

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