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农杆菌介导的厚皮甜瓜遗传转化体系的建立

文献类型： 中文期刊

作者： 唐伶俐 1 ; 徐龙兰 1 ; 徐永阳 1 ; 贺玉花 1 ; 田小琴 1 ; 张健 1 ; 孔维虎 1 ; 李文东 1 ; 赵光伟 1 ;

作者机构： 1.中国农业科学院郑州果树研究所;三亚中国农业科学院国家南繁研究院;潍坊创科种苗有限公司

关键词： 厚皮甜瓜;遗传转化;苗龄;侵染方式;抗性芽筛选

期刊名称： 果树学报

ISSN： 1009-9980

年卷期： 2024 年 41 卷 003 期

页码： 533-542

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： [目的]遗传转化是进行基因功能验证的重要手段,构建较为完善、高效的厚皮甜瓜遗传转化体系,为基因功能验证和厚皮甜瓜种质改良提供技术支撑.[方法]以厚皮甜瓜B8为材料,用携带植物双元表达载体pQY002005的根癌农杆菌介导转化B8子叶诱导再生,通过探究影响甜瓜遗传转化过程中的重要因子的作用,建立以B8为基础的甜瓜遗传转化体系.[结果]以正常光周期培养3 d的无菌苗子叶节为外植体,对其进行微刷+10 s超声处理可提高农杆菌侵染效率,荧光芽获得率达29.6%;压力85 kPa的2次5 min的抽真空侵染方式(间隔1 min)侵染效果较佳;4 mg·L-1的Basta较适宜筛选抗性植株.利用以上方法,单次转化120个子叶节外植体,可获得31个再生荧光芽,17株生根苗,通过PCR检测确定8株阳性苗,阳性率达58.8%,阳性植株获得率为6.7%.[结论]成功建立了以B8为材料的甜瓜高效遗传转化体系,为甜瓜关键基因功能验证和种质精准改良提供技术支持.

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