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稳转hTERT绵羊睾丸细胞系的建立

文献类型： 中文期刊

作者： 杨雪 1 ; 任善会 2 ; 王相伟 2 ; 龚真莉 2 ; 殷相平 2 ; 孙跃峰 2 ; 陈豪泰 2 ; 万学瑞 1 ;

作者机构： 1.甘肃农业大学动物医学院

2.中国农业科学院兰州兽医研究所

关键词： 绵羊;睾丸原代细胞;人端粒酶逆转录酶基因;hTERT;永生化细胞系

期刊名称： 中国动物传染病学报

ISSN： 1674-6422

年卷期： 2024 年 002 期

页码： 43-48

收录情况： 北大核心

摘要： 羊睾丸原代细胞的体外培养是探究牛羊病毒致病机理的重要材料，实际科研工作中常受困于此类细胞传代性差、性质不稳定等缺点。外源性导入人端粒酶逆转录酶基因（hTERT）可以促使端粒酶活性的表达，延长细胞体外培养寿命是一种有效建立细胞永生化的方法。本试验中，通过RT-PCR获得hTERT。利用同源重组的技术，成功的构建了hTERT的真核表达质粒和慢病毒质粒。利用慢病毒表达系统，建立了稳转hTERT绵羊的睾丸细胞系。间接免疫荧光和蛋白免疫印迹试验研究结果均显示，hTERT基因已成功整合进入绵羊睾丸基因组中并稳定表达。第30代次的羊睾丸细胞生长较快，性状较稳定，表明已成功构建了具有永生化特性的绵羊睾丸细胞系，为草食动物病毒的相关研究提供重要的细胞模型。

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