文献类型： 中文期刊

作者： 田启会 ¹ ; 柳民意 ¹ ; 姚威 ² ; 杨雪 ³ ; 尤婷 ⁴ ; 张红强 ⁵ ; 任善会 ³ ; 高小龙 ⁶ ;

作者机构： 1.甘肃畜牧工程职业技术学院

2.重庆市万州区畜牧产业发展中心

3.中国农业科学院兰州兽医研究所

4.临夏回族自治州畜牧技术推广站

5.天祝藏族自治县畜牧技术推广站

6.青海大学农牧学院

关键词： 小反刍兽疫;脊髓灰质炎病毒受体相关分子4(Nectin4);原核表达;多克隆抗体

期刊名称： 青海大学学报

ISSN： 1006-8996

年卷期： 2025 年 43 卷 005 期

页码： 68-73

摘要： 为制备绵羊Nectin4分子的多克隆抗体，本研究采用PCR技术将绵羊Nectin4基因克隆至pET-28a原核表达载体，随后转化至大肠杆菌Rosetta(DE3)感受态细胞进行诱导表达，产物纯化后免疫BALB/c小鼠制备多克隆抗体，通过间接ELISA法测定多克隆抗体效价，并用Western blot和IFA方法对多克隆抗体反应性进行进一步鉴定。结果表明：绵羊Nectin4基因全长1 607 bp,最佳诱导表达条件为温度30℃,IPTG浓度0.4 mmol/L,诱导时间14 h,表达的绵羊Nectin4蛋白分子量大小约59.3 kDa,制备的多克隆抗体效价为1∶64 000,Western blot和IFA结果显示，制备的多克隆抗体均可特异性识别绵羊Nectin4蛋白。本研究成功表达并纯化了绵羊Nectin4蛋白，且制备的多克隆抗体可特异性识别并结合绵羊Nectin4分子，可为后续深入探究PPRV致病机理提供材料基础。