文献类型： 中文期刊

作者： 朱娟 ¹ ; 谢雨辰 ² ; 陈艳荣 ² ; 唐顺明 ² ; 易咏竹 ² ; 沈兴家 ³ ;

作者机构： 1.江苏科技大学生物技术学院江苏省蚕桑生物学与生物技术重点实验室;中国农业科学院蚕业研究所农业部蚕桑遗传改良重点实验室

2.;江苏科技大学生物技术学院江苏省蚕桑生物学与生物技术重点实验室;中国农业科学院蚕业研究所农业部蚕桑遗传改良重点实验室

3.;江苏科技大学生物技术学院江苏省蚕桑生物学与生物技术重点实验室;中国农业科学院蚕业研究所农业部蚕桑遗传改良重点实验室;

关键词： 家蚕;启动子;山梨醇脱氢酶;滞育;转录起始位点;表达调控

期刊名称： 昆虫学报

ISSN： 0454-6296

年卷期： 2018 年 04 期

页码： 391-397

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 【目的】明确家蚕Bombyx mori滞育关联基因山梨醇脱氢酶基因BmSDH(BmSDH-1,BmSDH-2a和BmSDH-2b)的转录特性。【方法】用5'RACE技术确定家蚕3个BmSDH基因的转录起始位点。利用PCR技术克隆3个BmSDH基因约1 kb及BmSDH-2a不同长度的启动子区序列,分别构建带有萤火虫荧光素酶报告基因的载体pGL3-BmSDH-P-luc,并与pRL-CMV报告质粒(含海肾荧光素酶报告基因)共转染家蚕BmN细胞,通过双荧光素酶检测系统检测BmSDH基因启动子活性;分别在BmN细胞培养基中添加昆虫保幼激素、蜕皮激素和滞育激素,通过双荧光素酶检测系统检测不同浓度激素处理对BmSDH-2a基因启动子活性的影响。【结果】BmSDH-1的转录起始位点为A(-41),BmSDH-2a的转录起始位点为C(-41),BmSDH-2b的转录起始位点为A(-40)(翻译起始位点为+1)。双荧光素酶检测结果表明,BmSDH-2a启动子活性极显著高于BmSDH-1和BmSDH-2b启动子,BmSDH-2a 355 bp长度片段的启动子活性极显著高于674 bp和1 117 bp长度片段。用不同浓度滞育激素处理BmN细胞后,BmSDH-2a的1 117 bp启动子活性随着滞育激素浓度的升高有上升的趋势,当浓度高于100 ng/mL时启动子活性有所降低但仍保持在较高水平;用保幼激素进行处理后,随着激素浓度的升高启动子活性逐渐降低;蜕皮激素处理后,0.1 ng/mL激素显著增强启动子活性,当激素浓度继续升高启动子活性逐渐降低。【结论】确定了BmSDH基因的转录起始位点。BmSDH-2a启动子活性显著高于BmSDH-1和BmSDH-2b启动子,一定浓度的蜕皮激素能显著提高BmSDH-2a启动子活性。研究结果有助于阐明BmSDH基因在家蚕滞育中的功能。