您好，欢迎访问中国农业科学院 机构知识库！

全部

  • 全部
  • 标题
  • 学者
  • 机构
  • 关键词

4种牛分枝杆菌特异性基因PCR检测方法的比较与评价

文献类型： 中文期刊

作者： 辛凌翔 1 ; 王豪杰 1 ; 刘燕 1 ; 姚文生 1 ; 胡云皓 1 ; 张一帜 1 ; 赵浩然 1 ; 鑫婷 1 ; 朱良全 1 ;

作者机构： 1.中国兽医药品监察所;中国农业科学院北京畜牧兽医研究所

关键词： 牛分枝杆菌;病原;PCR;灵敏度;特异性

期刊名称： 畜牧与兽医

ISSN： 0529-5130

年卷期： 2023 年 55 卷 012 期

页码： 55-61

收录情况： 北大核心

摘要： 牛分枝杆菌是严重危害养牛业的重要人兽共患病原微生物,PCR是检测该病原的有效手段之一.本研究通过筛选最佳的PCR检测方法,以期为临床监测牛分枝杆菌感染提供技术参考.针对牛分枝杆菌4种常见的特异性基因(16SrRNA、IS6110、IS1081和Mpb64)分别设计引物,通过温度梯度PCR法确定最适退火温度;采用牛分枝杆菌参考株核酸确定PCR最小检测限,同时运用牛分枝杆菌国内参考株、牛分枝杆菌国际参考株、禽分枝杆菌、胞内分枝杆菌、副结核分枝杆菌、羊种布鲁菌以及牛种布鲁菌进行特异性比较试验;最后运用人工模拟牛分枝杆菌感染组织样本(肺脏、淋巴结、奶样)比较不同PCR方法检测效果.4对引物以60℃为退火温度时均能检测分枝杆菌,其中IS6110、IS1081和Mpb64基因引物可以特异性检测牛分枝杆菌.IS6110和IS1081基因引物对牛分枝杆菌基因组的检测灵敏度最高,可达10-10 ng/μL;IS6110基因引物在肺脏和淋巴结中牛分枝杆菌检测灵敏度可达106 CFU/mL以上,而Mpb64基因引物对奶样中牛分枝杆菌的检测灵敏度可达102 CFU/mL.本研究筛选出相对适宜的牛分枝杆菌PCR检测方法,为牛结核病病原学检测和临床应用提供技术支持.

  • 相关文献

[1]不同牛分枝杆菌特异性基因PCR方法的比较. 张春燕,秦玉明,边增杰,徐中清,牛凯,许冠龙,丁家波,鑫婷,朱良全. 2020

[2]马铃薯土传病原菌快速检测方法的比较分析及其应用. 李磊,赵昱榕,谢学文,石延霞,柴阿丽,李宝聚. 2020

[3]基因Ⅶ型新城疫病毒SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR检测方法的建立及初步应用. 孟春春,段云兵,仇旭升,金仕强,詹媛,张向乐,于圣青,丁铲. 2011

[4]植物罹病组织中象耳豆根结线虫的LAMP快速检测方法. 彭焕,丁中,贺文婷,黄文坤,彭德良. 2013

[5]基于RTCPA-CRISPR/Cas12a的牛病毒性腹泻病毒检测方法的建立及应用. 蒙琦,常亮,杨明,曹映辉,贺泂杰. 2025

[6]奶牛饲料中的动物源性成分PCR检测方法的建立及应用. 王晓光. 2006

[7]牛分枝杆菌特异性PCR检测方法的建立及初步应用. 刘思国,王春来,宫强,王牟平,彭永刚,张秀华,郭洋,郭设平,邵美丽. 2006

[8]快速检测金黄色葡萄球菌活菌的研究进展. 董蕾,刘慧敏,孟璐,王加启,郑楠. 2017

[9]牛分枝杆菌二价组合及融合DNA疫苗的免疫效果. 宫强,刘思国,王春来,刘慧芳,刘建东,施远祥,阿曼古丽,孔宪刚. 2009

[10]牛分枝杆菌重组蛋白TB27.4的表达、纯化及活性鉴定. 高新桃,李平俊,鑫婷,贾红,郭晓宇,张改梅,李明,刘淑清,朱鸿飞. 2014

[11]牛分枝杆菌外膜蛋白基因ompA的原核表达及免疫活性分析. 亓英芳,黄瑛,杜艳芬,刘慧芳,赫明雷,司微,倪洪波,王春来,刘思国. 2009

[12]牛分枝杆菌单基因及双价融合基因DNA疫苗免疫效果的研究. 宫强,刘思国,王春来,王勇,刘建东,迟磊,赵昆,周媛媛,常月红,云孟克,孔宪刚. 2007

[13]牛分枝杆菌抗原MPB70、MPB83和ESAT-的融合表达及重组蛋白的初步应用. 郭设平,刘思国,张秀华,王春来,宫强,郭洋,邵美丽. 2006

[14]牛分枝杆菌mpb64-ag85b-esat-6融合基因真核表达载体的构建及其在SP2/0细胞中的表达. 宫强,刘思国. 2008

[15]11种牛分枝杆菌抗原在牛结核病诊断中的初步评价. 高新桃,贾红,侯绍华,杨宏军,郭晓宇,袁维峰,姜一曈,朱鸿飞,鑫婷,丁家波. 2018

[16]牛分枝杆菌抗原MPB70、MPB83和ESAT-6的融合表达及重组蛋白的初步应用. 郭设平,刘思国,张秀华,王春来,宫强,郭洋,邵美丽. 2006

[17]牛分枝杆菌mpb64和Ag85B融合基因在大肠埃希氏菌中的原核表达. 郭设平,刘思国,王春来,邵美丽,宫强,刘建东. 2005

[18]牛分枝杆菌PPE68与Mb1230以及PPE57和PE-PGRS35的表达纯化及其在牛结核病血清学诊断中的初步应用. 李明,张雅娜,林伟东,隋修锟,贾红,侯绍华,姜一曈,房立春,朱鸿飞,鑫婷. 2019

[19]牛分枝杆菌mpb64基因的克隆、鉴定及其表达. 张秀华,刘思国,宫强,王春来,王牟平,彭永刚,沈国顺,郭洋,郭设平. 2005

[20]牛分枝杆菌Spoligotyping和VNTR-MIRU的基因分型研究. 杜艳芬,林靖凯,刘思国,王春来,刘慧芳,司微,王聃,赵海玲. 2009

作者其他论文 更多>>
置顶
购物车
反馈

© 京ICP备09089781号-29 主办单位：中国农业科学院

学术资源： 中国农业科学院 农业专业知识服务系统 农科联盟资源共建共享平台 中国农业科技文献与信息服务平台 中国农业期刊集成服务平台