文献类型： 中文期刊

作者： 时文健 ¹ ; 徐磊 ² ; 张泽 ¹ ; 杨蕊 ¹ ; 张广智 ¹ ; 许霄峰 ¹ ; 辛凌翔 ² ; 王楠 ² ; 鑫婷 ¹ ;

作者机构： 1.中国农业科学院北京畜牧兽医研究所农业农村部动物生物安全风险预警及防控重点实验室(北方)农业农村部兽用生物制品与化学药品重点实验室

2.中国兽医药品监察所

关键词： 结核分枝杆菌牛变种;MycoMar T7;突变体库;噬菌体

期刊名称： 微生物学通报

ISSN： 0253-2654

年卷期： 2025 年 52 卷 002 期

页码： 703-712

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 【背景】结核分枝杆菌牛变种(Mycobacterium tuberculosis variant bovis)可以感染人和多种动物，是重要的人兽共患病原菌。【目的】以结核分枝杆菌牛变种C68001为母本菌株，利用MycoMar T7转座子系统，构建结核分枝杆菌牛变种突变体库，为深入探究结核分枝杆菌牛变种基因功能和致病机制提供技术平台。【方法】以C68001为母本菌株，对其全基因序列进行分析预测；筛选温敏型噬菌体，优化噬菌体扩增条件和侵染条件；获得高库容的结核分枝杆菌牛变种C68001突变体库。【结果】基于Nanopore三代和二代测序技术绘制细菌基因组完成图，C68001的完整基因组大小为4.342 Mb，含有4 093个基因。成功筛选到温敏型噬菌体，并且滴度高于1×1011 PFU/mL，以感染复数(multiplicity of infection, MOI)为10侵染菌株C68001 3 h后获得9 216个单克隆的转座子突变体，随机挑选7个克隆进行PCR鉴定，证实转座子成功插入母本菌株。【结论】成功构建了结核分枝杆菌牛变种C68001的突变体库。