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鸭疫里默氏杆菌16S rRNA和dnaB基因的双重PCR检测方法的建立

文献类型： 中文期刊

作者： 丁云竹 1 ; 孙冰清 2 ; 姜盼 2 ; 崔俊生 2 ; 陶敏捷 2 ; 胡青海 2 ; 常维山 1 ;

作者机构： 1.山东农业大学动物科技学院

2.中国农业科学院上海兽医研究所

关键词： 鸭疫里默氏杆菌;双重PCR;鉴定;检测

期刊名称： 中国预防兽医学报

ISSN： 1008-0589

年卷期： 2017 年 39 卷 01 期

页码： 50-53

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为了快速、准确地鉴定鸭疫里默氏杆菌(RA),本实验根据RACH3株16SrRNA和dnaB基因序列设计引物,经引物筛选和PCR反应条件优化后,建立了检测RA的双重PCR方法。结果表明该方法对检测的所有不同血清型RA菌株均能扩增出364bp和627bp两条特异的目的片段,而对鸭致病性大肠杆菌、鸭源禽巴氏杆菌、肠炎沙门氏菌、黄杆菌等对照菌株的扩增结果均为阴性;该PCR方法对细菌HXb2基因组DNA和菌液的检测敏感性分别为17.33ng/mLDNA和2.9×10~3cfu/mL细菌。利用建立的双重PCR检测了RA感染鸭的肝脏和脑组织中的RA,结果显示该方法与细菌分离法符合率分别为100%(9/9)和77.8%(7/9),表明本实验建立的双重PCR方法可用于检测肝脏组织中RA。本研究建立的双重PCR方法既可以对分离的RA疑似菌株进行快速检测和鉴定,也可以直接用于临床样品中RA的检测。

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