文献类型： 中文期刊

作者： 陈妍 ¹ ; 丁云竹 ² ; 杨永胜 ² ; 徐欣欣 ² ; 王西 ² ; 宫艳杉 ² ; 杜晓莉 ² ; 常维山 ³ ; 成大荣 ¹ ; 徐建生 ¹ ; 胡青海 ² ;

作者机构： 1.扬州大学兽医学院

2.中国农业科学院上海兽医研究所

3.山东农业大学动物科技学院

关键词： 鸭疫里默氏杆菌;卡那霉素抗性;转座子随机突变;核糖体50S L27亚基;回复株

期刊名称： 中国动物传染病学报

ISSN： 1674-6422

年卷期： 2021 年 001 期

页码： 21-25

摘要： 为了鉴定鸭疫里默氏杆菌中与卡那霉素抗性相关的基因,本研究采用构建Yb2株转座子随机突变库结合卡那霉素抗性平板来筛选相关抗性基因。先以Yb2株为受体菌,携带质粒pEP4351的大肠杆菌BW19851（pEP4351）为供体菌,构建转座子Tn4351随机突变库。用含红霉素和卡那菌素的TSA进行筛选,得到卡那霉素耐药性降低的突变株DK-2;然后采用基因组步移的方法鉴定表明,转座子插入基因组上编码核糖50S L27亚基基因;再将携带野生株Yb2的50S L27基因的大肠杆菌-鸭疫里默氏杆菌穿梭表达载体pRES-50S L27导入突变株DK-2,构建得到了回复菌株cDK-2。结果表明:50S L27基因缺失对其生长无明显的影响,而DK-2突变株对卡那霉素、新霉素和利福平的敏感性均增强。本研究为进一步解析鸭疫里默氏杆菌50S L27亚基的功能奠定了基础。