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鸡APOBEC4稳定表达细胞系的建立与应用

文献类型： 中文期刊

作者： 石梦雨 1 ; 张耀丹 1 ; 孟春春 1 ; 孙英杰 1 ; 谭磊 1 ; 宋翠萍 1 ; 刘炜玮 1 ; 廖瑛 1 ; 仇旭升 1 ; 丁铲 1 ;

作者机构： 1.中国农业科学院上海兽医研究所

关键词： 载脂蛋白BmRNA编辑酶;抗病毒作用;稳定表达细胞系

期刊名称： 中国动物传染病学报

ISSN： 1674-6422

年卷期： 2022 年 30 卷 003 期

页码： 13-21

收录情况： 北大核心

摘要： 鸡APOBEC4是最新发现的载脂蛋白BmRNA编辑酶(APOBEC)家族成员,功能尚不明确.由于具有保守的胞苷脱氨酶基序,该家族蛋白能够诱导机体DNA或RNA发生广泛的胞嘧啶脱氨基突变,参与到机体免疫过程中去,在机体先天性免疫与适应性免疫中均发挥重要作用.这种RNA编辑作用亦可诱导病毒基因组突变,产生种类众多的突变株,但由于每种突变在群体中的比例极小,自然状态下会被优势准种掩盖难以检测,因此需要能够稳定表达该蛋白的细胞系作为模型进行研究.本实验室前期结果表明,鸡源APOBEC4主要在免疫细胞中表达,而传染性支气管炎病毒、流感病毒感染能够显著刺激鸡APOBEC4的大幅上调.为研究鸡APOBEC4编辑作用对病毒复制的影响,本研究利用慢病毒包装方法,将鸡源APOBEC4基因导入BHK21细胞,通过Real-time quantitative PCR和Western blot方法进行鉴定,得到能够稳定表达鸡APOBEC4的BHK21细胞系BHK21-APOBEC4,并发现鸡传染性支气管炎病毒(IBV)Beaudette株和禽流感病毒(AIV)H9N2株在该细胞系上的复制较对照组受到显著抑制,为进一步研究APOBEC4的生物学功能奠定基础.

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