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RNA解旋酶DDX46敲除对新城疫病毒复制和抗病毒免疫的影响

文献类型： 中文期刊

作者： 刘彦峰 1 ; 欧晓晴 1 ; 贺赛男 1 ; 唐兰兰 2 ; 赵飞扬 3 ; 廖瑛 1 ; 仇旭升 1 ; 谭磊 1 ; 宋翠萍 1 ; 丁铲 1 ; 孙英杰 1 ;

作者机构： 1.中国农业科学院上海兽医研究所

2.扬州大学兽医学院

3.福建农林大学动物科学学院

关键词： CRISPR/Cas9;DDX46;新城疫病毒;先天性免疫

期刊名称： 中国动物传染病学报

ISSN： 1674-6422

年卷期： 2025 年 33 卷 004 期

页码： 1-8

摘要： 本研究利用CRISPR-Cas9技术构建DEAD/H-box解旋酶超家族中DDX46敲除细胞，并评估DDX46敲除对新城疫病毒(NDV)复制和抗病毒免疫的影响。首先针对DDX46共设计3条sgRNA，构建重组LentiCRISPRv2-DDX46质粒，包装慢病毒并感染HeLa细胞，使用嘌呤霉素进行筛选，最后进行亚克隆筛选。通过测序以及Western blot验证，结果表明共得到2株杂合子DDX46敲除细胞系。NDV分别感染野生型和DDX46敲除细胞，结果显示NDV复制在DDX46敲除细胞中受到显著抑制，而干扰素β和下游干扰素刺激因子的表达量则显著增加，表明NDV感染细胞后，DDX46显著抑制宿主天然免疫，并促进病毒复制。上述研究为DDX46调控抗病毒先天性免疫的研究奠定了基础。

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[2]利用CRISPR/Cas9技术敲除TLR3基因及其影响NDV复制的研究. 邵玉乐,许曼,王辉,曾为俊,鲁国涛,赵丽丽,陈洪岩,刘建华,孟庆文. 2019

[3]应用CRISPR/Cas9敲除HeLa细胞DDX21基因对新城疫病毒复制的影响. 武炜,王飒,孟春春,仇旭升,廖瑛,谭磊,宋翠萍,刘炜玮,孙英杰,丁铲. 2019

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