文献类型： 中文期刊

作者： 赵宇馨 ¹ ; 祁晶晶 ² ; 尚原冰 ² ; 李浩然 ² ; 刘婷 ² ; 王宇 ² ; 王少辉 ² ; 田明星 ² ; 高崧 ¹ ; 于圣青 ² ;

作者机构： 1.扬州大学兽医学院

2.中国农业科学院上海兽医研究所

关键词： 鸡毒支原体;磷酸甘油酸变位酶;原核表达;亚细胞定位;免疫原性

期刊名称： 中国动物传染病学报

ISSN： 1674-6422

年卷期： 2025 年 33 卷 003 期

页码： 42-50

摘要： 鸡毒支原体（MG）感染鸡、鸭、鹅等多种禽类，引起慢性呼吸道疾病，导致产蛋率下降、生长发育受阻，给养禽业造成的经济损失大。磷酸甘油酸变位酶（PGM）是一种参与糖酵解和葡萄糖异生的重要酶，研究表明PGM在一些病原菌的膜表面分布，并能结合宿主细胞的胞外基质蛋白，在病原菌致病过程中发挥重要作用，而MG中的PGM蛋白（MGPGM）相关方面的研究少见报道。对MGPGM进行原核表达、亚细胞定位检测及免疫原性分析，为进一步探索MGPGM的生物学功能奠定基础。通过PCR扩增MG的pgm全基因序列（MGpgm），连接表达载体pET-28a（+）并进行原核表达及纯化，获得重组MGPGM（rMGPGM）蛋白；制备抗rMGPGM兔血清，提取MG菌的全菌蛋白、膜蛋白以及胞浆蛋白，与抗rMGPGM兔血清进行Western blot反应，分析其在MG菌中的亚细胞定位情况；抗rMGPGM兔血清与MG菌进行悬浮免疫荧光分析，测定PGM在MG的膜表面定位情况；用MG R_low感染阳性鸡血清与rMGPGM蛋白进行Western blot反应，分析其免疫原性。在大肠杆菌BL21中成功表达rMGPGM蛋白，制备的兔抗rMGPGM血清抗体效价为102 400，Western blot 显示抗rMGPGM的兔血清能与MG全菌蛋白、膜蛋白以及胞浆蛋白反应，且MGPGM不仅在胞浆中大量分布，也少量分布在膜蛋白组分中；悬浮免疫荧光试验进一步证实MG的细胞膜表面有PGM蛋白分布；且MG感染血清与rMGPGM蛋白具有明显反应条带，说明rMGPGM具有较好的免疫原性。文章证实了MGPGM蛋白在MG的膜表面分布，同时还具有较好的免疫原性，为进一步研究MGPGM蛋白在MG致病过程中的作用提供参考。