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非洲猪瘟病毒CD2v阻断ELISA检测方法的初步建立与应用

文献类型: 中文期刊

作者: 王彩霞 1 ; 于浩洋 1 ; 吴佳俊 2 ; 杨振 3 ; 贾红 4 ; 仇松寅 1 ; 刘晓飞 1 ; 吴绍强 1 ; 冯春燕 1 ; 林祥梅 1 ;

作者机构: 1.中国检验检疫科学研究院动物检验与检疫研究所

2.中国动物疫病预防控制中心

3.南京农业大学动物医学院

4.中国农业科学院北京畜牧兽医研究所

关键词: 非洲猪瘟病毒;CD2v蛋白;阻断ELISA;敏感性;特异性

期刊名称: 中国兽医科学

ISSN: 1673-4696

年卷期: 2024 年 008 期

页码: 1050-1055

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 为了建立特异性检测CD2v抗体的非洲猪瘟病毒(ASFV)阻断ELISA方法,以杆状病毒表达的CD2v蛋白作为包被抗原,以抗ASFV CD2v蛋白的特异性阻断单克隆抗体为检测抗体,经过条件优化以及敏感性和特异性检测,建立了特异性检测CD2v抗体的ASFV阻断ELISA方法。结果显示,建立的阻断ELISA的最佳抗原包被量为20 ng/孔,待检血清样本最佳稀释度为1∶1,酶标抗体最佳稀释度为1∶10 000。当血清样品的PI≥41.23%时,判定结果为CD2v抗体阳性,当血清样品的PI<41.23%时,判定结果为CD2v抗体阴性。特异性试验结果显示,该方法仅能与ASFV阳性血清反应,与伪狂犬病病毒、猪圆环病毒2型、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪细小病毒和猪瘟病毒等猪病病毒疫苗毒阳性血清无交叉反应;敏感性试验结果显示,该方法最低能检测出128倍稀释的阳性血清;批内和批间重复性试验的变异系数均小于10%;对64份猪血清样品盘样品进行检测,结果显示符合率为96.88%。上述结果表明,本研究中建立的基于CD2v蛋白的ASFV阻断ELISA方法,联合p30等ASFV抗原血清学诊断方法可以用于CD2v缺失毒株的鉴别检测,为我国出现的ASFV CD2v缺失毒株的流行病学调查及疫情监测提供有效的检测技术。

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