文献类型： 中文期刊

作者： 高柯欣 ¹ ; 李艳华 ² ; 张艳禾 ³ ; 汤艳东 ³ ; 安同庆 ³ ; 蔡雪辉 ³ ; 周双海 ¹ ; 王淑杰 ³ ;

作者机构： 1.北京农学院动物医学院

2.东北农业大学动物医学学院

3.中国农业科学院哈尔滨兽医研究所动物疫病防控全国重点实验室

关键词： 大豆皂苷Bc;伪狂犬病病毒;抗病毒

期刊名称： 中国预防兽医学报

ISSN： 1008-0589

年卷期： 2025 年 47 卷 006 期

页码： 545-552

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为研究大豆皂苷Bc（SS-Bc）对伪狂犬病病毒（PRV）复制的影响，本研究采用CCK-8法测定SS-Bc对Vero E6细胞的半数细胞毒性浓度(CC₅₀)为253.6μg/m L，同时测定了SS-Bc对PRV的半数抑制浓度(IC₅₀)为21.61μg/m L。根据上述结果，将不同浓度的SS-Bc（15μg/mL、30μg/mL、60μg/mL）与PRV-GFP（MOI 0.01）共处理Vero E6细胞，通过倒置荧光显微镜观察含绿色荧光的细胞数量，结合Image J软件分析荧光强度，并采用Reed-Muech法测定细胞上清中的病毒滴度(TCID₅₀)；进一步采用不同浓度的SS-Bc（30μg/mL、60μg/mL）分别与不同MOI的PRV-GFP（MOI0.05、MOI 0.1及MOI 0.5）共处理Vero E6细胞，24 h后检测上述指标。结果显示，与阳性对照组相比，SS-Bc处理组细胞的相对荧光强度值和细胞上清中病毒的TCID₅₀均极显著降低（P<0.01），且对病毒的抑制作用呈剂量依赖性，60μg/mL时效果最佳；即使在较高MOI PRV感染下，SS-Bc仍极显著抑制该病毒的增殖（P<0.01）。为了确定SS-Bc的最佳给药方式，本实验于PRV-GFP（MOI 0.01）感染后不同时间，以SS-Bc（60μg/mL）处理Vero E6细胞24 h后检测上述指标。结果显示，所有药物处理组的CPE数量、相对荧光强度值和细胞上清中病毒的TCID₅₀均极显著低于阳性对照组（P<0.01），其中PRV感染后1 h和3 h给药时抑制病毒增殖的效果更佳。进一步体外模拟病毒感染各阶段，将SSBc（60μg/mL）与PRV-GFP（MOI 0.1和1）以不同方式处理后接种Vero E6细胞，采用荧光定量PCR（qPCR）检测病毒吸附、内化及复制阶段gB基因mRNA的相对转录水平，在释放阶段测定细胞上清中病毒的TCID₅₀，分析SS-Bc对PRV感染的影响。结果显示SS-Bc在PRV的吸附和复制阶段均显著降低了gB基因mRNA的转录水平（P<0.05），但SS-Bc在病毒的内化和释放阶段均无显著影响。综上所述，本研究首次证实SS-Bc在体外能够显著抑制PRV的增殖，主要作用于病毒的吸附和复制阶段；且无论在病毒接种前、同时或接种后给药，SS-Bc均表现出良好的抗病毒效果，其中在病毒进入细胞后给药效果更佳。本研究为SS-Bc作为潜在的抗PRV药物提供了科学依据，并为SS-Bc的进一步研究和临床应用奠定了基础。