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鸭疫里默氏杆菌TonB依赖性受体TbdR2基因缺失株的构建

文献类型: 中文期刊

作者: 卢凤英 1 ; 苗双 2 ; 倪欣涛 1 ; 屠晶 2 ; 俞慧 2 ; 姜盼 2 ; 潘玲 1 ; 胡青海 2 ;

作者机构: 1.安徽农业大学动物科技学院

2.中国农业科学院上海兽医研究所

关键词: 鸭疫里默氏杆菌;TonB依赖的受体;缺失突变株;自杀质粒

期刊名称: 中国家禽

ISSN: 1004-6364

年卷期: 2013 年 35 卷 16 期

页码: 21-24

收录情况: 北大核心

摘要: 用PCR方法扩增tbdR2基因的左右臂和壮观霉素抗性基因表达盒,然后将以上3个片段组成的同源重组同源臂LSR连接到自杀性质粒pDS132上,构建得到重组自杀质粒pDS-TbdR2-LSR。再将此质粒通过接合转导的方法导入到鸭疫里默氏杆菌CH3株。用含卡那霉素和壮观霉素的TSA筛选可能的基因缺失株,并对其进行PCR鉴定,获得基因缺失株CH3△tbdR2。CH3△tbdR2稳定性检测结果表明该缺失株能够稳定存在。另外,CH3△tbdR2突变株在电镜下的细菌形态以及在TSA培养基上的菌落形态与野生株CH3相似。表明通过自杀质粒同源重组的方法获得了鸭疫里默氏杆菌CH3株TonB依赖受体TbdR2的基因缺失株CH3△tbdR2,为下一步研究TbdR2的功能奠定了基础。

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