文献类型: 中文期刊
作者: 董美 1 ; 胡晓颖 1 ; 孟丽霞 1 ; 宛煜嵩 1 ; 刘卫晓 1 ; 金芜军 1 ; 李亮 1 ;
作者机构: 1.中国农业科学院生物技术研究所
关键词: cry1A基因;简并引物;方法建立;成分检测;转基因监管
期刊名称: 中国农业科技导报
ISSN: 1008-0864
年卷期: 2020 年 007 期
页码: 174-180
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: cry1A基因编码苏云金芽孢杆菌杀虫晶体蛋白,是转基因植物使用最为广泛的抗虫基因,包括cry1Ab、cry1Ac、cry1A.105、cry1Ab/Ac等类型,cry1A基因为靶标的检测方法在转基因植物安全监管与检测中尤为重要.虽已建立数种cry1A基因检测方法,但均因该基因间序列差别较大而无法覆盖大部分转化体.由此,采用简并引物的策略,开发了一种cry1A基因通用检测方法,检测能力覆盖了常见的16种含cry1A的转化体,开发过程包括实验室内部方法建立和实验室间循环验证.结果表明,该方法在引物终浓度0.4μmol·L-1,退火温度64℃的条件下,能够特异性检测样品中含有的cry1A基因,检出限为0.1%.开发的cry1A基因检测方法参数全面,重复性和重现性良好,为国内外转基因成分监管与检测提供方法参考.
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