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猪嵴病毒重组酶聚合酶扩增结合侧流层析试纸条(RPA-LFD)快速诊断方法的建立与应用

文献类型: 中文期刊

作者: 蔡应奎 1 ; 刘新生 2 ; 张丽萍 2 ; 周鹏 2 ; 王永录 2 ;

作者机构: 1.甘肃亚盛农业研究院有限公司

2.家畜疫病病原生物学国家重点实验室

关键词: 猪嵴病毒;重组酶聚合酶扩增(RPA);侧流层析(LFD);快速诊断方法

期刊名称: 中国兽医科学

ISSN: 1673-4696

年卷期: 2020 年 007 期

页码: 820-824

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 自2007年在猪粪便中首次检测到猪嵴病毒(PKV)以来,该病毒已在世界范围内被广泛报道,并可能与仔猪的腹泻有关.本研究首次建立了以重组酶聚合酶扩增结合侧流层析试纸条(RPA-LFD)的技术来检测PKV的快速、可视化的诊断方法,并对此方法的敏感性、特异性及重复性进行了评价.结果显示,该方法具有良好的特异性,仅可以特异性扩增PKV,与其它主要猪病毒没有交叉反应;最佳反应时间和温度是RPA在37℃下20 min及LFD在室温下10 min;检测极限为1*10~2拷贝的PKV.利用本研究建立的RPA-LFD方法和常规RT-PCR方法同时检测20份猪的临床粪便样品,结果显示,RPA-LFD方法检测猪嵴病毒阳性率为60%,明显高于常规RT-PCR的50%.上述结果表明,RPA-LFD方法可应用于猪嵴病毒的快速检测.

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