文献类型： 中文期刊

作者： 黄书伦 ¹ ; 查晶晶 ¹ ; 孙普 ¹ ; 章兴赜 ¹ ; 李冬 ¹ ; 曹轶梅 ¹ ; 白兴文 ¹ ; 付元芳 ¹ ; 马雪青 ¹ ; 李坤 ¹ ; 袁红 ¹ ; 卢曾军 ¹ ; 刘在新 ¹ ; 李平花 ¹ ;

作者机构： 1.中国农业科学院兰州兽医研究所/兰州大学动物医学与生物安全学院动物疫病防控全国重点实验室

关键词： 口蹄疫(FMD);重组病毒;构建;免疫原性

期刊名称： 微生物学报

ISSN： 0001-6209

年卷期： 2024 年 64 卷 007 期

页码： 2493-2501

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 【目的】利用反向遗传操作技术，构建含O型口蹄疫病毒（food-and-mouth disease virus,FMDV） 3个拓扑型免疫优势结构蛋白基因的重组FMDV，评估其作为猪O型口蹄疫（food-and-mouth disease,FMD）疫苗候选株的潜力。【方法】通过基因合成，在FMD疫苗株O/HN/CHA/93 （古典中国拓扑型）的基因中嵌合流行株O/NXYCh/CHA/2018 （东南亚拓扑型） VP1结构蛋白的重组病毒骨架上，用O/TUR/5/2009疫苗株（中东-南亚拓扑型） VP1蛋白的G-H环基因替换其对等基因，构建含O型3个拓扑型FMDV结构蛋白基因的重组全长质粒，Not I线性化后转染表达T7 RNA聚合酶的BSR/T7细胞，拯救重组病毒。通过RT-PCR、序列测定、间接免疫荧光鉴定重组病毒；噬斑试验和一步生长曲线分析重组病毒的生物学特性。重组病毒制备疫苗免疫猪，用病毒中和试验分析其对当前流行的O型3个拓扑型FMDV的交叉反应性。【结果】成功拯救到含O型3个拓扑型FMDV结构蛋白基因的重组病毒，重组病毒与亲本病毒具有相似的生物学特性。亲本病毒和重组病毒制备的疫苗免疫猪，均能够对中东-南亚型（Middle East-South Asia,ME-SA）拓扑型和东南亚型（South-East Asia,SEA）拓扑型病毒株产生保护性平均中和抗体(>1.65log₁₀)；均不能对古典中国型（Cathay）拓扑型流行株产生保护性平均中和抗体(<1.65log₁₀)，但与亲本病毒相比，O/TUR/5/2009疫苗株G-H环基因的替换显著提高了对ME-SA和SEA拓扑型病毒株的交叉反应性（P<0.05）。【结论】本研究对未来FMD疫苗的设计具有重要的指导意义。