文献类型： 中文期刊

作者： 李思琪 ¹ ; 秦嫘 ¹ ; 孟凡丹 ² ; 杨勇博 ² ; 王淑杰 ² ; 蔡雪辉 ¹ ;

作者机构： 1.东北农业大学动物医学学院

2.兽医生物技术国家重点实验室

关键词： 化脓隐秘杆菌;炎症小体;细胞焦亡;炎症反应

期刊名称： 中国预防兽医学报

ISSN： 1008-0589

年卷期： 2023 年 010 期

页码： 1054-1060,1079

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为探究化脓隐秘杆菌（Trueperella pyogenes）在肝脏中诱导炎症小体活化的机制，本研究以2×106 cfu/只腹腔注射化脓隐秘杆菌的小鼠为感染模型，分别于感染后不同时间采集小鼠肝脏组织，分别提取肝细胞RNA和蛋白质，将RNA反转录成cDNA作为模板，利用荧光定量PCR检测小鼠肝脏组织中NLRP-3、ASC、IL-18、IL-1β和TNF-α m RNA的转录水平，同时通过western blot检测小鼠肝细胞中炎症小体信号通路蛋白NLRP-3、AIM2、ASC、Caspase-1、NLRP-1和细胞焦亡信号通路相关蛋白GSDMD-C、IL-18和IL-1β的表达。结果显示，与对照组相比，感染化脓隐秘杆菌后1 d、2 d和7 d的小鼠肝组织内炎症小体信号通路蛋白基因及促炎细胞因子基因的转录水平均显著升高（P＜0.05）;western blot检测感染后1 d、2 d、4 d和7 d的小鼠肝细胞蛋白，结果显示，与对照组相比，小鼠肝细胞内除NLRP-1的表达无差异外，其他炎症小体信号通路相关蛋白及促炎细胞因子表达量均显著或极显著升高（P＜0.05,P＜0.01）。上述结果证实化脓隐秘杆菌可诱导肝细胞中NLRP-3/ASC和AIM2/ASC炎症小体复合物的激活，继而促进Caspase-1的成熟与GSDMD的切割，引起肝细胞焦亡，导致大量促炎细胞因子释放。本研究进一步通过western blot检测化脓隐秘杆菌感染后1 d、2 d、4 d和7 d的小鼠肝细胞中NF-κB信号通路中p65和磷酸化p65蛋白（p-p65）的表达水平，结果显示，与对照组相比，p-p65蛋白的表达量显著升高（P＜0.05），表明NF-κB信号通路被激活。同时，本研究也对化脓隐秘杆菌感染小鼠后1 d、2 d、4 d和7 d采集的肝脏组织进行病理学观察，结果显示，与对照组织相比，肝细胞均发生变性及坏死。本研究证实在化脓隐秘杆菌感染的小鼠肝细胞内炎症小体和NF-κB信号通路参与了感染期间的炎症反应，为化脓隐秘杆菌引起肝脏炎症反应发生的机制研究提供参考依据。