文献类型： 中文期刊

作者： 宋若楠 ¹ ; 刘春草 ² ; 李航 ² ; 王真真 ¹ ; 贾楠楠 ² ; 朱杰 ² ; 李传峰 ² ; 程松 ³ ; 梁留存 ³ ; 刘光清 ² ; 王金泉 ¹ ; 孟春春 ¹ ;

作者机构： 1.新疆农业大学

2.中国农业科学院上海兽医研究所

3.德国纳博科临中国检测实验室

关键词： 铁蛋白;犬α干扰素;融合表达;抗病毒活性

期刊名称： 中国动物传染病学报

ISSN： 1674-6422

年卷期： 2024 年 32 卷 004 期

页码： 91-96

摘要： 为获得治疗犬病毒性传染病的特效药物，本研究将铁蛋白与犬α干扰素进行融合表达。首先根据GenBank中公布的犬α干扰素序列(IFN2a)合成模板，通过融合PCR连入铁蛋白编码基因的上游，并将该重组基因克隆至原核表达载体pCold-TF中，获得重组质粒pCold-TF-CaIFN2a-Fe。转化BL21后用异丙基-β-D硫代半乳糖苷(IPTG)诱导，经聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)，蛋白免疫印迹(Western blot)鉴定，获得约89 kDa的可溶性重组目的蛋白。重组蛋白经镍柱纯化后，使用犬肾细胞/水疱疹性口炎病毒(MDCK/VSV)微量细胞病变抑制法检测抗病毒活性，效价确定为8×10～4 IU/mg，显示出良好的应用前景。