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BTV16重组VP2蛋白原核表达、多克隆抗体制备及间接ELISA检测方法的建立与初步应用

文献类型: 中文期刊

作者: 张明珠 1 ; 王鹏 2 ; 田佳鑫 2 ; 陈士刚 2 ; 鲍君铎 2 ; 仇相书 2 ; 鲁会军 1 ; 李昌 1 ;

作者机构: 1.吉林农业大学动物医学院

2.中国农业科学院长春兽医研究所

关键词: 原核表达;多克隆抗体;间接ELISA;BTV

期刊名称: 中国兽医学报

ISSN: 1005-4545

年卷期: 2024 年 44 卷 012 期

页码: 2549-2555

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 蓝舌病毒(BTV)是我国法定的多种动物共患的二类动物疫病,对反刍动物养殖业的危害极大,BTV共有29个血清型,BTV16是我国目前流行的主要血清型之一。BTV感染后主要表现为隐性感染,因此建立ELISA检测方法对流行病学的检测极为重要。本研究通过原核表达系统进行BTV16 VP2蛋白的表达,使用BALB/c小鼠进行多克隆抗体的制备。建立并优化了以VP2蛋白为包被抗原的间接ELISA检测方法。对广西壮族自治区临床样品进行检测,并与商品化试剂盒进行符合率分析。结果表明,成功表达并纯化出BTV16 VP2蛋白,制备的多克隆抗体具有良好的免疫原性。ELISA检测方法具有良好的特异性,对赤羽病病毒(AKAV)、口蹄疫病毒(FMDV)和盖塔病毒(GETV)等反刍动物疫病无交叉反应,阴、阳性的临界值为0.314,批间和批内的变异系数(Cv)均小于5%,具有良好的重复性,对79份广西壮族自治区的样品进行检测,阳性率为92.4%,与商品化试剂盒比较符合率为98.7%。本研究成功建立了一种BTV16间接ELISA检测方法,用于牛临床样品的检测。

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