禽腺病毒血清4型SYBR GreenⅠ荧光定量PCR检测方法的建立与应用
文献类型: 中文期刊
第一作者: 卢清侠
作者: 卢清侠;金前跃;冯丽丽;柴永笑;郭振华;邢广旭;张改平
作者机构:
关键词: 禽腺病毒血清4型;Hexon基因;荧光定量PCR;检测
期刊名称: 河南农业科学
ISSN: 1004-3268
年卷期: 2022 年 012 期
页码: 131-138
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: 为建立禽腺病毒血清4型(Fowl adenovirus serotype 4,FAdV4)临床检测方法,根据GenBank中该病毒Hexon基因序列设计扩增引物,将扩增的Hexon基因连接至pEASY-Blunt载体,构建重组质粒pEASY-Blunt-Hexon,同时对Hexon基因进行分析,选取高度保守区域,设计荧光定量检测引物,建立FAdV4 SYBR GreenⅠ荧光定量PCR检测方法。该方法扩增产物长度为95 bp,最低检测下限为7.1×10~2拷贝/μL,且与其他禽源病毒无交叉反应,批内和批间重复性试验变异系数均不超过2%,具有良好的特异性和重复性。将建立的检测方法应用于检测FAdV4在鸡肝癌细胞(Leghorn male hepatocellular cells,LMH)上的增殖特性,并与TCID50法测定的病毒滴度进行比较,结果显示,2种检测方法具有良好的相关性。综上,本研究建立的检测方法可用于FAdV4的临床早期快速检测。
分类号: S852.65
- 相关文献
[1]禽腺病毒血清4型纳米PCR检测试剂盒的研制及应用. 王利丽,郑丽,田向学,李秀丽,任卫科,路超,张莉,池晶晶,鄢明华. 2020
[2]猪圆环病毒2型荧光定量PCR检测方法的建立. 张福良,宋长绪,杨鸣琦,朱道中,蒋智勇,林志雄,刘燕玲,宋志军. 2006
[3]应用实时荧光定量PCR技术检测土壤中根肿病菌休眠孢子. 任佐华,杨华,刘二明. 2015
[4]兔支气管败血波氏杆菌TaqMan荧光定量PCR检测方法的建立与应用. 钱微,刘燕,肖琛闻,韦强,季权安,鲍国连,姚火春. 2013
[5]猪伪狂犬病病毒野毒SYBR-Green Ⅰ实时荧光定量PCR方法的建立. 常晨,张道华,唐波,刘国阳,华涛,侯继波. 2017
[6]鸡体抗病毒蛋白基因荧光定量PCR检测方法的建立和初步应用. 黄艳艳,高丹丹,许传田,杨少华,黄庆华,张琳,张秀美,吴家强. 2016
[7]SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR检测类猪圆环病毒因子P1. 温立斌,何孔旺,杨汉春,郭容利,周俊明,钟书霖. 2009
[8]猪JAK-1、JAK-2、STAT-1和STAT-2TaqMan荧光定量RT-PCR检测方法的建立及应用. 蔺文成,王晓玲,刘芹防,崔尚金. 2011
[9]猪RIG-1、TLR-9、IRF-3和IRF-7mRNATaqMan荧光定量RT-PCR检测方法的建立及应用. 王晓玲,蔺文成,刘芹防,崔尚金. 2011
[10]茶尺蠖核型多角体病毒荧光定量PCR检测方法的建立. 杜军利,张传溪,肖强,付建玉,殷坤山. 2010
[11]一种新型鸭呼肠孤病毒SYBRGreenⅡ荧光定量PCR方法的建立. 丁明洋,戚伟强,陈宗艳,朱杰,吴巧梅,缪秋红,李传峰,吴润,刘光清. 2016
[12]荧光定量PCR检测硬蜱体内莱姆病螺旋体的研究. 曹杰,仝彩玲,周勇志,张厚双,周金林. 2010
[13]猪JAK-1、JAK-2、STAT-1和STAT-2 TaqMan荧光定量RT-PCR检测方法的建立及应用. 蔺文成,王晓玲,刘芹防,崔尚金. 2011
[14]猪RIG-1、TLR-9、IRF-3和IRF-7mRNA TaqMan荧光定量RT-PCR检测方法的建立及应用. 王晓玲,蔺文成,刘芹防,崔尚金. 2011
[15]一种新型鸭呼肠孤病毒SYBR Green II荧光定量PCR方法的建立. 丁明洋,戚伟强,陈宗艳,朱杰,吴巧梅,缪秋红,李传峰,吴润,刘光清. 2016
[16]猪JAK-1/JAK-2/STAT-1和STAT-2TaqMan荧光定量RT-PCR检测方法的建立及应用. 蔺文成,王晓玲,刘芹防,崔尚金. 2011
[17]一种新型鸭呼肠孤病毒SYBR GreenⅡ荧光定量PCR方法的建立. 丁明洋,戚伟强,陈宗艳,朱杰,吴巧梅,缪秋红,李传峰,吴润,刘光清. 2016
[18]基于线粒体DNA 16S rRNA基因鉴别畜禽肉中鸭源性成分研究. 张晶鑫,樊艳凤,唐修君,贾晓旭,葛庆联,陆俊贤,高玉时. 2016
[19]LNA探针实时荧光定量PCR检测小麦矮缩病毒体系的建立. 刘艳,王锡锋. 2016
[20]LNA 探针实时荧光定量PCR 检测小麦矮缩病毒体系的建立. 刘艳,王锡锋. 2016
作者其他论文 更多>>
-
猪瘟病毒PCR-ELISA检测方法的初步应用
作者:王利平;金前跃;刘兴友;王选年;谭东鹤;李鹏
关键词:猪瘟病毒;PCR-ELISA;荧光定量PCR;间接免疫荧光
-
狂犬病毒GSQY-Dog-China-2013株全基因组序列测定和遗传进化分析
作者:邢广旭;姜中毅;焦文强;王方雨;张改平
关键词:狂犬病病毒;GSQY-Dog-China-2013;全基因组序列测定;遗传进化分析
-
猪伪狂犬病病毒gE蛋白的真核表达及其活性鉴定
作者:王清龙;王瑞宁;王勋;李青梅;李鸽;张真真;杨苏珍;郭军庆;张改平
关键词:猪伪狂犬病病毒;gE蛋白;分泌表达;糖基化修饰;抗原活性
-
利用基因工程技术提高非生物胁迫下水稻产量的研究进展
作者:段俊枝;杨翠萍;王楠;齐学礼;冯丽丽;燕照玲;齐红志;陈海燕;张会芳;卓文飞;李莹
关键词:水稻;非生物胁迫;基因工程;调节基因;功能基因;产量
-
河南省主要农作物种业发展建议
作者:滑留帅;卢清侠;田云峰
关键词:河南省;主要农作物;种业;育种;高质量发展
-
猪圆环病毒3型TB GreenⅡ实时荧光定量PCR检测方法的建立和应用
作者:李鹏;孙延举;王寅彪;金前跃;梁晓晓;银梅;王选年;刘兴友;王利平
关键词:猪圆环病毒3型;TB GreenⅡ;实时荧光定量PCR;常规PCR;病毒检测
-
稳定表达猪δ冠状病毒S1蛋白CHO细胞系的构建与鉴定
作者:孙雪珂;丁培阳;王思桥;刘思源;李明慧;常泽杰;陈艺兰;李瑞琪;张改平
关键词:猪δ冠状病毒;S1蛋白;CHO细胞;稳定表达;蛋白质纯化