牛星状病毒和牛病毒性腹泻病毒及牛传染性鼻气管炎病毒三重荧光PCR方法的建立与应用
文献类型: 中文期刊
第一作者: 赵亮
作者: 赵亮;温肖会;翟颀;李家奎;贾春玲;周秀蓉;王焕硕;吕殿红;罗胜军
作者机构:
关键词: 牛星状病毒;牛病毒性腹泻病毒;牛传染性鼻气管炎病毒;三重荧光PCR
期刊名称: 中国兽医科学
ISSN: 1673-4696
年卷期: 2023 年 010 期
页码: 1242-1248
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: 为快速同时检测牛星状病毒(BAstV)、牛病毒性腹泻病毒(BVDV)和牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV),本研究针对BAstV基因组ORF1a基因、BVDV基因组多聚蛋白基因和IBRV基因组g B基因的保守区域各设计特异性引物和探针,经反应体系和扩增程序优化,建立了BAstV、BVDV和IBRV三重荧光PCR检测方法,对该方法的特异性、敏感性和重复性进行试验,并应用该方法对临床样品进行检测。结果显示,该方法可扩增BAstV、BVDV和IBRV的核酸,不能对多杀性巴氏杆菌(Pm)、B型牛鼻炎病毒(BRBV)、口蹄疫病毒(FMDV)等病原的核酸进行扩增,特异性较强;对BAstV、BVDV和IBRV的最低检测限(LOD)均为305copies/μL,敏感性较高;检测BAstV、BVDV和IBRV的组内、组间重复性试验变异系数(CV)值均小于3%,重复性较好。应用该方法检测100份临床样品,BAstV、BVDV、IBRV的阳性检出率分别为0、11%、6%。本研究建立的三重荧光PCR方法具有敏感性高、特异性强、在同一反应体系中可以快速鉴别检测BAstV、BVDV、IBRV等优点,可应用于临床BAstV、BVDV、IBRV感染的检测。
分类号: S852.65
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