小黄鱼中杀香鱼假单胞菌实时荧光定量PCR检测技术的建立

文献类型： 中文期刊

第一作者： 沈宁远

作者： 沈宁远;韩明明;陈琳;詹炜;刘峰;谢庆平;徐万土;陈黎明;楼宝

作者机构：

关键词： 杀香鱼假单胞菌;荧光定量PCR;小黄鱼

期刊名称： 浙江海洋大学学报(自然科学版)

ISSN：

年卷期： 2023 年 002 期

页码： 109-119

摘要： 自2015年首次实现小黄鱼全人工育种以来，小黄鱼各项养殖技术获得了长足发展，但病害防治形势依然十分严峻，其中由杀香鱼假单胞菌引发的内脏白点病是小黄鱼养殖过程中的主要病害。为准确预判该病的爆发时间并争取有效预防，建立了一种能高效、定量检测杀香鱼假单胞菌的方法。通过在小黄鱼鱼体内分离鉴定获得杀香鱼假单胞菌菌株，将其DNA回旋酶B亚基基因（gyrB）中一特异片段与pClone007 Blunt Vector载体重组得到重组质粒，后者经过转染大肠杆菌感受态细胞、LB-氨苄西林（ampicillin,AMP）选择性培养和测序鉴定，获得能表达gyrB特异片段的阳性质粒的菌落，进一步将阳性菌落进行扩大培养、质粒提取及纯化得到质粒标准品。利用设计合成的特异引物及逐级稀释的质粒标准品建立杀香鱼假单胞菌实时荧光定量PCR检测标准曲线和反应体系。通过验证，运用该技术灵敏度达到10 copies·μL-1，并且组内和组间变异系数均小于0.82%。建立的方法实现了对小黄鱼中杀香鱼假单胞菌的快速定量检测，能够精确反映该菌在养殖水体及鱼体内的季节性变化并确立其流行规律，为小黄鱼内脏白点病的早期诊断提供了准确有效工具，同时为建立小黄鱼病害预警系统提供了良好的技术支撑。

分类号： S943

  • 相关文献

[1]黄海中南部小黄鱼当年幼鱼生长特征的研究. 张国政,李显森,朱建成,戴芳群,金显仕. 2010

[2]小黄鱼生物学研究进展. 黄昊,程起群. 2010

[3]海州湾小黄鱼幼鱼和黄鲫幼鱼的食物竞争. 郭斌,张波,戴芳群,金显仕. 2011

[4]利用Bootstrap统计方法探讨体长-体重关系中的幂指数对小黄鱼产卵期的指示作用. 刘勇,程家骅,陆健健. 2011

[5]长江口两种重要石首鱼类的摄食习性. 张波,金显仕,戴芳群. 2008

[6]HACCP在小黄鱼罐头生产中的应用. 钟文珠,沈伟征,王强,石建高. 2007

[7]基于线粒体Cyt b基因的黄海、东海小黄鱼(Larimichthys polyactis)群体遗传结构. 吴仁协,柳淑芳,庄志猛,金显仕,苏永全,唐启升. 2009

[8]黄海中南部小黄鱼种群生物学特征的季节变化和年际变化. 单秀娟,李忠炉,戴芳群,金显仕. 2011

[9]东海区小黄鱼渔业生物学现状的分析. 林龙山,程家骅. 2004

[10]三门湾和吕四近岸小黄鱼仔稚鱼耳石微结构特征比较. 黎雨轩,汤建华,徐献明,许津,刘志远,徐浩,程家骅. 2013

[11]再议中国近海小黄鱼种群的划分问题. 徐兆礼,陈佳杰. 2010

[12]桁拖网渔具刚性栅栏对鱼类的分隔效率研究. 张健,张鹏,孙满昌,彭永章. 2009

[13]应用改进的Leslie法估算东海区小黄鱼资源量. 张寒野,刘勇,程家骅. 2012

[14]黄海南部和东海小黄鱼资源分布差异性研究. 林龙山,姜亚洲,刘尊雷,窦硕增,高天翔. 2010

[15]昼夜垂直移动对黄海中南部小黄鱼可捕系数的影响. 关丽莎,单秀娟,金显仕,陈云龙,杨涛,吴强. 2018

[16]小黄鱼Larimichthys polyactis体长-体重关系幂指数与产卵群体空间分布相关性研究. 刘勇,程家骅. 2014

[17]黄海海州湾小黄鱼幼鱼的食性及其随体长的变化. 郭斌,张波,金显仕. 2010

[18]东海和黄海南部近岸海域小黄鱼稚幼鱼耳石元素指纹特征分析. 徐浩,黎雨轩,张翼,张辉,刘尊雷,李圣法. 2015

[19]黄海南部和东海小黄鱼资源动态的比较. 刘尊雷,谢汉阳,严利平,袁兴伟,杨林林,黎雨轩,吴颖,程家骅. 2013

[20]黄海南部小黄鱼生长、死亡和最适开捕体长. 张国政,李显森,金显仕,朱建成,戴芳群. 2010

作者其他论文 更多>>

微信小程序