大肠杆菌DH5a菌株高效电击转化条件的优化
文献类型: 中文期刊
第一作者: 吕新
作者: 吕新;刘兰英;李玥仁
作者机构:
关键词: 大肠杆菌;DH5a菌株;高效;电击转化
期刊名称: 福建农业科技
ISSN: 0253-2301
年卷期: 2023 年 54 卷 002 期
页码: 8-12
摘要: 为探索大肠杆菌DH5a高效电击转化条件,通过对电击转化条件中细胞生长状态、DNA加入量、感受态细胞体积、电场强度、速冻和恢复时间等关键因素进行优化,筛选出大肠杆菌DH5a高效电击转化条件.结果表明:大肠杆菌在细胞生长状态OD600值为0.6时制备感受态细胞,按每管50 μL体积分装、-80℃乙醇速冻后,加入10 pg pUC 19质粒DNA,在20 kv·cm-1电场强度、电容25 μF、电阻200 Ω条件下电击转化,转化后恢复培养60 min,转化效率达1010 cfu·μg-1 DNA以上水平,可满足基因文库构建、抗体库筛选等试验需求.
分类号: Q939.9
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