采用GFP标记筛选抑制多血清型口蹄疫病毒3C基因表达的siRNA

文献类型： 中文期刊

第一作者： 张志彬

作者： 张志彬;张健;贺明;高倍瑶;贾琪;张立春

作者机构：

关键词： 小干扰RNA(siRNA);口蹄疫(FMD);绿色荧光蛋白(GFP);多血清型;3C基因

期刊名称： 中国兽医杂志

ISSN： 0529-6005

年卷期： 2023 年 08 期

页码： 1-5

收录情况： 北大核心

摘要： 为筛选出可抑制多种血清型口蹄疫病毒(FMDV)的小干扰RNA(siRNA),本试验通过多血清型口蹄疫病毒序列比对与siRNA设计分析，筛选出潜在抗多血清型siRNA位点；通过体外合成A型、O型和Asia I型病毒部分基因序列，制备绿色荧光蛋白(GPF)基因融合表达载体；将化学合成的siRNA与融合表达载体共转染，通过GFP观察、Western blot和实时荧光定量反转录PCR(qRT-PCR)方法检验目标siRNA对融合基因的抑制效率。生物信息分析发现，多血清型口蹄疫病毒3C基因高度保守并存在潜在siRNA作用靶位，GFP-3C融合表达载体成功构建，与化学合成的siRNA1-3C共转染293T细胞，GFP观察发现，siRNA1-3C可有效抑制来源于A型、O型和Asia I型3C基因的GFP-3C荧光信号且持续时间达72 h, Western blot检测证实此结果。qRT-PCR检测发现，siRNA1-3C对3个GFP-3C融合基因转录水平抑制效率超85%,且作用可维持72 h。本试验利用GFP作为筛选标记成功筛选出1个作用于FMDV 3C基因的siRNA,为开发多血清型口蹄疫抑制剂提供参考依据。

分类号： S852.65

  • 相关文献

[1]靶向传染性法氏囊病病毒VP1基因siRNA对病毒复制的抑制. 欧阳伟,王永山,刘小娟,张海彬. 2011

[2]FMD、GSF、PRRS三种疫苗同时分点免疫效果观察. 黄丽丽,李才民,林哲敏,周建乐,叶保国,张艳,曹宗喜. 2016

[3]FMD、CSF、PRRS三种疫苗同时分点免疫效果观察. 黄丽丽,李才民,林哲敏,周建乐,叶保国. 2016

[4]FMD、CSF、PRRS联合免疫方案在临高猪上的效果观察. 郑心力,林哲敏,叶保国,黄丽丽,张艳,曾德权,曹宗喜. 2016

[5]口蹄疫检测技术研究进展. 黄银君,戈银生,张文智,赵允中. 1995

[6]猪肠道病毒甲型3C基因的克隆和原核蛋白的表达. 孙杰,朱琳,焦点,俞正玉,范宝超,袁万哲,王建辉,郭容利,何孔旺,李彬. 2017

[7]牛α-IFN及FMDVP12A3C双表达载体的构建及其在BHK-21细胞中的表达. 杨彬,兰喜,李宝玉,殷相平,李学瑞,柳纪省. 2012

[8]牛α-IFN及口蹄疫病毒P12A3C组合基因双表达载体的构建及其在BHK-21细胞中的表达. 杨彬,兰喜,李宝玉,殷相平,柳纪省. 2010

[9]表达Asia1型口蹄疫病毒P1-2A和3C基因的重组山羊痘病毒弱毒株的构建. 张强,鞠厚斌,吴国华,颜新敏,李健,朱海霞,马维民,郑海学,朱彩珠,才学鹏. 2009

[10]牛α-IFN及FMDV P12A3C双表达载体的构建及其在BHK-21细胞中的表达. 杨彬,兰喜,李宝玉,殷相平,李学瑞,柳纪省. 2012

[11]含O型FMDVP1-2A、3C基因和EGFP基因表达盒的构建. 王建科,吴国华,叶奕优,颜新敏,朱海霞,李健,朱彩珠,张强,王雯慧. 2009

[12]口蹄疫病毒3C基因与增强型绿色荧光蛋白基因的真核共表达. 魏衍全,田宏,吴锦艳,陈妍,尚佑军,窦永喜,刘湘涛,才学鹏. 2011

[13]O型口蹄疫病毒蛋白酶3C基因在哺乳细胞中的表达. 马琪,陈豪泰,薛慧文. 2014

[14]共表达AsiaⅠ型口蹄疫病毒P1-2A和3C基因重组山羊痘病毒的构建及鉴定. 鞠厚斌,张强,周锦萍,刘佩红,卫广森. 2009

[15]O型口蹄疫病毒OA58株3C基因的克隆与真核表达. 刘萍,丛国正,杨孝朴,沈小燕,邵军军,独军政,林彤,王光华,易华山,常惠芸,谢庆阁. 2007

[16]猪嵴病毒3C蛋白的原核表达及其结构分析. 王琛,兰喜,祝俊鹏,杨彬. 2016

[17]表达Asia 1型口蹄疫病毒P1-2A和3C基因的重组山羊痘病毒弱毒株的构建. 张强,鞠厚斌,吴国华,颜新敏,李健,朱海霞,马维民,郑海学,朱彩珠,才学鹏. 2009

[18]农杆菌介导甘蔗梢腐病病原菌YN41的遗传转化. 郭强,王鑫,徐世强,王继华,崔一平. 2016

[19]绿色荧光蛋白(GFP)研究进展. 汪恒英,周守标,常志州,马艳,秦卫华. 2004

[20]GFP标记的球孢白僵菌在玉米中的定殖. 隋丽,徐文静,张正坤,杨芷,王志慧,杜茜,汪洋洲,陈日曌,李启云,路杨. 2018

作者其他论文 更多>>

微信小程序