科研产出
饲用氨基酸的生物合成与产业化应用
《动物营养学报 》 2025 北大核心 CSCD
摘要：饲用氨基酸在低蛋白质饲粮配合技术中的应用既能保障动物的营养需求，又能提高养殖经济效益，同时还具有显著的环境保护效应，在现代集约化养殖中具有广阔的应用前景。生物技术的进步推动了氨基酸生产效率的提升和成本的降低，使得合成氨基酸在饲料行业的应用更加广泛和可行。本文介绍了当前在饲料行业中已广泛应用的饲用合成氨基酸种类及功能研究进展，综述了重要饲用氨基酸（赖氨酸、苏氨酸、色氨酸、异亮氨酸、缬氨酸和亮氨酸）在大肠杆菌或谷氨酸棒杆菌中的生物合成途径，详细阐述了重要饲用氨基酸生产菌株遗传改良的代谢工程策略，并在展望中提出了未来饲用氨基酸生产菌株工程化改造的方向。
关键词： 低蛋白质饲粮 氨基酸 生物制造 合成途径 菌株改良
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不同染色方法在大豆锈菌侵染过程中的显微观察效果
《中国油料作物学报 》 2025 北大核心 CSCD
摘要：由豆薯层锈菌引起的大豆锈病是热带、亚热带地区大豆的主要病害，可造成大豆严重减产。了解大豆锈菌的侵染特征有利于更好地开展抗锈育种研究。本研究利用番红固绿、DAPI(4′,6-二脒基-2-苯基吲哚)、荧光增白剂和麦胚凝集素WGA488(wheat germ agglutinin, Alexa FluorTM 488 conjugate)四种染料对接种锈菌叶片进行染色观察，比较4种染色方法的效果。结果显示：采用番红固绿染色可清晰地观察到叶肉组织排列特征、孢子堆和新生夏孢子等；DAPI染色适于观察细胞核的状态和数量；荧光增白剂可将菌丝和植物细胞明确区分开，利于观察孢子入侵以及菌丝在叶肉组织内的分布特征；WGA488染料只能使真菌着色，适合观察菌丝在叶肉组织中扩展的整体性和连续性。根据研究目的及需要选取适合的染色方法，有助于精准地掌握大豆锈菌的显微结构特征及其侵染过程。
关键词： 大豆锈菌 显微观察 侵染过程 番红固绿 荧光增白剂 DAPI WGA488
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鸡Fnip1基因克隆、组织表达及生物信息学分析
《江苏农业学报 》 2025 北大核心 CSCD
摘要：为了明确鸡卵泡素相互作用蛋白1基因(Fnip1)特征及其表达规律，本研究选择苏禽3号黄羽肉鸡为试验材料，运用分子克隆技术扩增了鸡Fnip1基因CDS区序列全长，对其序列特性进行了生物信息学分析，构建了系统进化树；利用RT-qPCR方法检测了Fnip1基因在鸡不同组织中的表达。结果获得鸡Fnip1基因CDS区，序列开放阅读框为3 474 bp,位于第13号染色体16 191 415 bp至16 251 731 bp之间，编码1 157个氨基酸。生物信息学分析结果显示，Fnip1基因有20个外显子，FNIP1蛋白含有FNIP＿N、FNIP＿M和FNIP＿C等3个结构域；进化树显示，鸡先与鸟类聚为一类，再与哺乳动物聚为一支，在禽类上序列保守。FNIP1蛋白为亲水性蛋白，相对分子量为128 310,理论等电点为5.25。蛋白质二级结构由α-螺旋(34.40%)、β-折叠(4.06%)、延伸链(13.74%)、无规则卷曲(47.80%)组成。表达分析结果显示，Fnip1基因在鸡的胸肌和腿肌中表达量显著高于其他组织。综上所述，本研究获得了鸡Fnip1基因CDS区序列全长，发现其在鸡肌肉组织中有较高表达。本研究结果可为进一步研究Fnip1基因在鸡肌肉生长发育中的分子机制研究奠定数据支撑。
关键词： 鸡 Fnip1 基因克隆 表达分析 生物信息学分析
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辽宁省野生小豆及其近缘野生种调查搜集与豆象抗性鉴定
《植物遗传资源学报 》 2025 北大核心 CSCD
摘要：针对辽宁省野生小豆及其近缘野生种濒危情况日趋严重的问题，对辽宁省14个市的36个区（县）开展了野生小豆及其近缘野生种的抢救性搜集，并对搜集的资源进行了豆象抗性鉴定。结果表明，野生小豆Vigna angularis var. nipponensis主要分布于辽中和辽东地区，尤其是在辽东沿海区域，而近缘野生种Vigna radiata var. sublobata和Vigna minima则主要分布于辽西地区；共搜集到262份野生小豆及其近缘野生种种质资源；城市化进程的加快以及人类活动的影响是导致辽宁野生小豆及其近缘野生种濒危的主要原因；野生小豆及其近缘野生种在生长习性、茎秆、荚色和粒色等方面与栽培小豆Vigna angularis var. angularis具有明显差异。此外，本研究还对搜集的野生小豆及其近缘野生种进行了豆象抗性鉴定，筛选出2份高抗豆象和1份抗豆象资源，这是国内外首次发现的抗豆象小豆资源。本研究结果为我国野生小豆及其近缘野生种的珍稀濒危资源保护和利用提供了重要依据，同时为小豆抗豆象育种提供了珍贵的种质资源。
关键词： 野生小豆 近缘野生种 种质资源 调查搜集 豆象抗性鉴定
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紫花苜蓿抗旱育种研究现状及展望
《草业学报 》 2025 北大核心 CSCD
摘要：紫花苜蓿属豆科四倍体多年生草本植物，目前在世界范围内广泛种植，是草食动物所需的优质蛋白饲草资源。发展紫花苜蓿产业对全球各国农业产业和畜牧业都具有重要意义。然而，随着世界范围内干旱等极端气候的频繁出现及水资源短缺，旱灾已是束缚整个紫花苜蓿产业发展的关键因素，培育抗旱性强的紫花苜蓿品种，不但能保持高产稳产，还能节约水资源。因此，本研究主要综述了国内外紫花苜蓿种质资源收集保存及抗旱性鉴定评价情况，抗旱品种审定登记现状以及抗旱育种存在的问题及挑战，并对我国紫花苜蓿抗旱育种工作进行了展望。旨在为我国紫花苜蓿抗旱育种的发展提供技术支撑及参考。
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饲粮添加不同形态锰对肉仔鸡血浆常规生化指标、血浆和肝脏抗氧化及免疫特性的影响
《中国畜牧杂志 》 2025 北大核心
摘要：试验旨在研究饲粮中添加不同形态锰对肉仔鸡血浆生化指标和肝脏抗氧化、免疫相关基因表达的影响。选取1日龄AA肉仔公鸡按平均体重随机分为对照组、硫酸锰组和中等螯合强度有机蛋白锰组（前期均添加锰110 mg/kg，后期添加锰80 mg/kg），试验周期为42 d。结果表明：与对照组和无机硫酸锰组相比，添加中等螯合强度蛋白锰降低了肉仔鸡血浆中尿酸（UA）含量和乳酸脱氢酶（LDH）活性（P<0.05）；与对照组相比，2种锰源皆提高了肉仔鸡血浆中白蛋白（ALB）和白介素1β(IL-1β)含量及总超氧化物歧化酶（T-SOD）和锰超氧化物歧化酶（MnSOD）活性（P<0.05），降低了血浆中丙二醛（MDA）含量（P<0.05）；与无机硫酸锰组相比，中等螯合强度蛋白锰提高了血浆MnSOD活性（P<0.05）；并且提高了肉仔鸡肝脏MnSOD、谷胱甘肽过氧化物酶4(Gpx4)和白细胞介素-10(IL-10)的mRNA表达水平（P<0.05），降低了肉仔鸡肝脏中IL-1β和核因子-κB-p65(NF-κB p65)的mRNA表达水平；与无机硫酸锰相比，中等螯合强度蛋白锰提高了MnSOD mRNA表达水平（P<0.05）。由此可见，饲粮中添加无机硫酸锰或中等螯合强度蛋白锰显著改善了肉仔鸡某些血浆常规生化指标、血浆和肝脏抗氧化及免疫特性，但中等螯合强度蛋白锰的抗氧化效应及改善氨基酸利用的效应明显优于无机硫酸锰。
关键词： 硫酸锰 中等螯合强度蛋白锰 抗氧化 免疫特性 肉鸡
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非洲猪瘟病毒pK205R蛋白间接ELISA抗体检测方法的建立
《畜牧与兽医 》 2025 北大核心
摘要：旨在建立可以检测非洲猪瘟病毒(ASFV)非结构蛋白pK205R抗体的血清学检测方法。基于杆状病毒表达系统构建重组杆粒Bacmid-pK205R,以纯化的pK205R蛋白为包被抗原，优化各项反应条件，建立间接ELISA抗体检测方法，验证方法的特异性、灵敏性、重复性，并对临床血清样品进行检测。结果显示：pK205R蛋白可以与ASFV阳性血清发生发应，ELISA方法的抗原包被浓度为50 ng/孔，4℃过夜包被，封闭液为2%牛血清白蛋白(BSA),37℃封闭1 h,待检血清以5%脱脂乳进行1∶200稀释，37℃孵育0.5 h;二抗工作浓度为1∶5 000,37℃孵育0.5 h, 37℃下显色10 min;该方法的阳性临界值为0.186(≥0.186为阳性，<0.186为阴性),且具有良好的特异性、灵敏性、可重复性，与商品化试剂盒符合率为79.92%。本研究成功建立pK205R非洲猪瘟间接ELISA抗体检测方法，为进一步优化和研制非洲猪瘟抗体的快速检测试剂盒提供了参考。
关键词： 非洲猪瘟病毒 pK205R蛋白 间接ELISA 杆状病毒表达
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西藏日喀则地区羊梨形虫病原调查和分析
《中国兽医杂志 》 2025 北大核心
摘要：为了解我国西藏自治区日喀则市藏羊梨形虫病的流行情况，本试验采集了366份藏羊血液样品并提取基因组DNA，采用巢式PCR方法对藏羊梨形虫病病原进行检测和鉴定，并基于梨形虫18S rRNA基因序列构建系统进化树。结果显示，梨形虫阳性率为35.79%(131/366)，其中绵羊泰勒虫阳性率为35.25%(129/366)，环形泰勒虫阳性率为0.55%(2/366)；系统进化树结果显示，该地区绵羊泰勒虫与中国新疆株（GenBank:FJ603460）、土耳其株（GenBank:AY260172）和苏丹株（GenBank:AY260171）处于同一分支；环形泰勒虫与意大利株（GenBank:MT341858）、土耳其株（GenBank:524666）和中国内蒙古株（GenBank:EU083801）处于同一分支。本试验首次报道了西藏地区存在绵羊泰勒虫，为西藏地区羊梨形虫病的流行病学调查和综合防控提供了数据参考。
关键词： 藏羊 梨形虫 巢式PCR 系统进化树 流行病学调查
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基因Ⅰ型日本脑炎病毒NS1蛋白的多克隆抗体制备及鉴定
《中国兽医科学 》 2025 北大核心 CSCD
摘要：乙型脑炎（Japanese encephalitis,JE）是由三带喙库蚊媒介传播的日本脑炎病毒（Japanese encephalitis virus,JEV）感染引起的，临床表现以神经症状为主。NS1蛋白作为JEV编码的非结构蛋白，能够诱导机体产生非中和作用的保护性抗体，是JE诊断和疫苗研发的主要靶标。本研究以基因Ⅰ型JEV的NS1蛋白为靶标，将构建的重组质粒p ET30a-His-NS1转化Rosetta(DE3)表达菌，以0.5 mmol/L IPTG诱导表达。结果显示，与预期蛋白分子量大小一致的重组NS1蛋白以包涵体形式表达。经亲和层析柱纯化获得浓度为2.568 mg/mL的重组His-NS1蛋白。免疫印迹和间接免疫荧光结果表明，制备的高效价抗NS1蛋白多克隆抗体能够特异性识别蛋白分子量分别为46和55 ku的天然NS1蛋白。此外，本研究首次发现制备的抗NS1蛋白多克隆抗体与JEV预孵育能够剂量依赖性的显著降低JEV感染BHK-21细胞的病毒产量。将抗NS1蛋白多克隆抗体作为免疫沉淀抗体，用于JEV感染PK-15细胞的免疫沉淀质谱分析。结果表明，NS1蛋白能够与囊膜E蛋白相互作用。总之，本研究为深入了解NS1蛋白的生物学功能、JE诊断方法的建立和疫苗研制提供了基础材料。
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基于线虫模型的流苏石斛和鼓槌石斛神经保护作用研究
《中国食物与营养 》 2025
摘要：目的：探讨不同浓度的鼓槌石斛乙醇提取物（DCLA）、鼓槌石斛水提物（DCLW）、流苏石斛乙醇提取物（DFHA）、流苏石斛水提物（DFHW）对秀丽隐杆线虫α-突触核蛋白聚集的抑制作用。方法：以秀丽隐杆线虫为模型生物，实验分为空白组、左旋多巴阳性药组和石斛提取物组，检测0.1、1、10、100 mg/mL的DCLA、DCLW、DFHA、DFHW的黄色荧光蛋白荧光强度，检测其抗α-突触核蛋白聚集作用。结果：与空白组相比，DCLA、DCLW、DFHA、DFHW均对α-突触核蛋白聚集显示出显著抑制作用，且在各实验组中，10 mg/mL均为最佳抑制浓度，其抑制活性由大到小为DCLA>DFHA>DCLW>DFHW。从不同溶剂提取方式来看，乙醇提取物比水提物显示出更明显的抑制活性，可能是生物碱类和黄酮类成分发挥的作用。结论：鼓槌石斛和流苏石斛水提物及醇提物均有一定的神经保护作用，10 mg/mL DCLA抗α-突触核蛋白聚集作用最强，石斛中的生物碱类和黄酮类可能是神经保护的活性成分。
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