文献类型: 会议论文
第一作者: 江锦秀
作者: 江锦秀 1 ; 林裕胜 1 ; 江斌 1 ; 林甦 1 ; 胡奇林 1 ;
作者机构: 1.福建省农业科学院畜牧兽医研究所
关键词: 疑似山羊传染性胸膜肺炎病;肺组织;无胆甾原体;分离纯化技术
会议名称: 福建省科协第十五届学术年会畜牧兽医分会场——福建省畜牧兽医学术年会
主办单位: 福建省畜牧兽医学会
页码: 61-61
摘要: 为了明确福建省某羊场发生的疑似山羊传染性胸膜肺炎病例的病原,本研究利用支原体培养基对肺组织的病原进行分离培养和纯化,通过生化试验和特异性PCR方法进行鉴定.研究结果显示:病羊肺组织在液体培养基上传代后,培养1-2d后,培养基颜色变黄且不浑浊,经液体-固体培养基3轮克隆纯化后,在体视显微镜下,可见菌落为圆形,突起,无中心脐。该分离菌用吉姆萨染色,在显微镜(用油境)观察,可见分离菌呈淡紫色,具有高度多形性,以小球状和杆状为主。分离菌株使含10%葡萄糖的培养基颜色从红色变为黄色,而不接菌的对照管培养基不变色,即分离菌株能发酵葡萄糖;分离菌株不能使含10%精氨酸的液体培养基(不含葡萄糖)变色,而且对照管也不变色,即分离菌株不能水解精氨酸;分离菌株不能使含10%尿素的液体培养基(不含葡萄糖)变色,而且对照管也不变色,即分离菌株不分解尿素;分离菌株不能使含0.2g.L-1氯化三苯基四氮唑的液体培养基(不含酚红和葡萄糖)变色,而且对照管也不变色,即氯化四氮唑还原反应阴性;分离菌株在无血清的液体培养基中传3代,培养基颜色变黄,无血清对照管不变色,即胆固醇需要试验阴性。用支原体目16S rRNA通用引物扩增获得目的条带560bp,与预期片段大小相符。用莱氏无胆甾原体特异性引物扩增也获得目的条带505bp,与预期片段大小相符。用丝状支原体簇丝状支原体簇特异性引物、绵羊肺炎支原体特异性引物、无乳支原体特异性引物以及精氨酸支原体特异性引物均未扩增出任何条带。分离菌株的16SrRNA基因的部分序列与莱氏无胆甾原体标准株序列的同源性为99.6%。以上鉴定结果表明本次分离到的支原体为莱氏无胆甾原体,此为福建省首次报道。关于该莱氏无胆甾原体的致病性等特性,本实验室正在进一步研究。
分类号: S858.27:S856.3
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