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牛干扰素α基因的改造与可溶性表达研究

文献类型： 会议论文

第一作者： 缪德年

作者： 缪德年 1 ; 张弦 2 ; 廖学文 2 ; 张克春 1 ;

作者机构： 1.上海市农业科学院,上海201106

2.上海市奶牛研究所,上海200436

关键词： 奶牛病毒病;牛干扰素α;基因改造;可溶性表达

会议名称： 中国畜牧兽医学会兽医内科与临床诊疗学分会第八届代表大会暨学术研讨会

主办单位： 中国畜牧兽医学会兽医内科与临床诊疗学分会

页码： 165-168

摘要： 随着奶牛集约化养殖程度不断提高，奶牛病毒性疾病的感染率也在逐年上升牛干扰素α(Bovine interferon-α,BoIFN-α)原始基因在重组大肠杆菌中多以包涵体形式表达,为在大肠杆菌表达系统中获得可溶性表达的具有活性的重组BoIFN-α,在不改变干扰素原有氨基酸组成的前提下,根据大肠杆菌密码子偏好性对BoIFN-α基因进行子优化.将优化后的BoIFN-α成熟蛋白基因分别克隆到表达载体pET-28a、PET30a和pColdⅡ载体中,转化大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达.优化后的BoIFN-α基因在3种载体中均获得可溶性表达,但以在载体pColdⅡ中获得的可溶性表达量最高.对重组菌rBoIFN-α-pColdⅡ/BL21的表达条件进行优化,在IPTG浓度为0.64 mmol/L,诱导温度为15℃,诱导时间为9h的条件下,可溶性目的蛋白的表达量最高,达36 mg/L菌液.重组BoIFN-α在MDBK细胞上抗水泡性口炎病毒的活性为1×106 U/mg.

分类号： S858.23:S855.3

  • 相关文献

[1]牛干扰素α基因的改造与可溶性表达研究. 缪德年,张弦,廖学文,张克春. 2015

[2]牛干扰素α基因的改造与可溶性表达研究. 缪德年,张弦,廖学文,张克春. 2015

[3]基因的推理设计与改造——体外分子进化的捷径. 熊爱生,姚泉洪,章镇,彭日荷,庄静,徐芳,刘金戈,朱宏. 2006

[4]重组猪γ-干扰素的表达与纯化. 王荣谈,郭佳宏,彭丽英,廖学文,姚慧娟,樊生超,缪德年. 2014

[5]猪圆环病毒2d亚型病毒样颗粒的制备. 夏叶,郭佳宏,廖学文,李春华,易建中,凌红丽,蒋贻海,缪德年. 2017

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