文献类型: 学位论文
年份: 2015
导师姓名: 姜永萍
作者: 刘兵
出版单位: 中国农业科学院
关键词: SPF鸡;BALB/c小鼠;流感病毒;唾液酸受体;组织分布
研究方向: 兽医学
摘要: 病毒与细胞表面受体结合是感染发生的第一步,特异性受体在机体组织中的分布在一定程度上决定了病毒的宿主嗜性。通常认为禽流感病毒能特异性与主要存在于禽呼吸道上皮细胞表面的SAα2,3 Gal受体结合,而人流感病毒则与主要分布于人呼吸道上皮细胞表面的SAα2,6 Gal受体结合。然而,近年来,禽流感病毒感染人事件却频繁发生,而这种现象发生的内在机制仍不清楚。因此,本研究拟利用免疫组化的方法,结合病毒结合试验,对SPF鸡与BLAB/c小鼠各个组织器官的流感病毒唾液酸受体分布进行研究,希望能够为禽流感病毒宿主嗜性以及跨种传播提供基础数据。通过凝集素免疫组化方法,我们系统性的分析了模型动物SPF鸡与BALB/c小鼠体内各组织中SAa2,3 Gal受体和SAa2,6 Gal受体的分布情况,得到了SPF鸡与BALB/c小鼠的唾液酸受体分布图谱。凝集素组化结果显示,SAα2,3 Gal和SAa2,6 Gal受体广泛存在于SPF鸡与BALB/c小鼠的大部分组织,不同组织之间的丰度存在差异。在SPF鸡中,鼻甲、胸腺中只存在SAa2,3 Gal受体;肺泡和胰腺只存在SAa2,6 Gal受体;肝、法氏囊以SAa2,6 Gal受体为主:肌胃、回肠、泄殖腔、脾、肾脏以SAa2,3 Gal受体为主;其余组织中同时存在两种受体。在BALB/c小鼠中,结肠和直肠中只存在SAa2,6 Gal受体;气管、肾、胃中以SAa2,3 Gal受体为主;食道、脾、鼻甲中以SAa2,6 Gal受体为主;其余组织同时存在两种受体。利用SAa2,3 Gal受体特性的流感病毒A/Duck/Anhui/2/2006(H5N1)[AH2]和SAα2,6 Gal受体特性的流感病毒A/Sichuan/1/2009(H1N1)[SC1]进行了病毒结合试验,结果显示,未观察到法氏囊与AH2与SC1结合;而SPF鸡脑组织与AH2无明显结合;BALB/c小鼠的结肠和直肠没检测到SAa2,3 Gal受体,却能同时与AH2与SC1结合;睾丸组织几乎没有检测出唾液酸受体,也能同时与AH2与SC1结合。AH2和SC1均能够与SPF鸡和BALB/c小鼠的其余组织发生结合,且结合范围和强度差别并不大。本研究结果表明,SAa2,3 Gal和SAa2,6 Gal受体广泛存在于SPF鸡与BALB/c小鼠的大部分组织,但总体上来看,在SPF鸡中,以SAa2,3 Gal受体为主,在BALB/c小鼠中,以SAa2,6 Gal受体为主;SAa2,3 Gal受体病毒AH2和SAa2,6 Gal受体病毒SC1均能够与SPF鸡和BALB/c小鼠的大部分组织发生结合。凝集素组化与病毒结合试验结果之间存在差异,这可能由多种因素造成的,具体原因还有待于进一步分析研究。这也提示流感病毒的组织嗜性具有复杂性,很有可能还有其他未知机制参与了该过程。
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