文献类型: 中文期刊
作者: 华炯钢 1 ; 叶伟成 1 ; 倪征 1 ; 陈柳 1 ; 朱寅初 1 ; 云涛 1 ; 张存 1 ;
作者机构: 1.浙江省农业科学院畜牧兽医研究所
关键词: 新型鸭呼肠孤病毒;σB蛋白;单克隆抗体;抗原表位
期刊名称: 中国预防兽医学报
ISSN: 1008-0589
年卷期: 2022 年 44 卷 004 期
页码: 428-434
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: σB蛋白是新型鸭呼肠孤病毒(NDRV)的外衣壳蛋白之一,可诱导宿主机体产生群特异性抗体.为制备NDRV σB蛋白的单克隆抗体(MAb),并鉴定其抗原表位,本研究利用原核表达后纯化的重组σB蛋白(rσB)免疫BALB/c小鼠,取其脾淋巴细胞与SP2/0细胞融合,以纯化的rσB为包被抗原,通过间接ELISA方法筛选出3株杂交瘤细胞,其分泌的MAb分别命名为10-A5、A1-A9和B7-E5.将NDRV ZJ00M株以MOI 0.01感染DF-1细胞72 h后收获细胞,通过western blot鉴定获得的MAb与天然表达的σB蛋白的反应性;分别将NDRV ZJ00M株、鸭经典呼肠孤病毒(CDRV)ZJ2000M株和鸡呼肠孤病毒(ARV)S1133株均以MOI0.01感染DF-1细胞,48 h后经间接免疫荧光试验(IFA)鉴定MAb的交叉反应性.Western blot结果显示,3株MAb均在41 ku出现特异性条带,表明其均能够与NDRV σB蛋白发生特异性反应;IFA结果显示:3株MAb均与NDRV反应,而不与CDRV和ARV发生交叉反应.上述结果表明,本研究制备的MAb反应原性和特异性均较强.利用人工合成的37条NDRV σB蛋白多肽及其截短的多肽,采用肽扫描法结合间接ELISA方法对3株MAb识别的抗原表位进行鉴定,并通过抗原表位氨基酸序列比对,分析该抗原表位在禽正呼肠孤病毒各成员中的保守性.结果显示,3株MAb识别的最小抗原表位均为33DIEEFHTPDVI43,且该抗原表位氨基酸序列在不同地域和不同宿主来源的NDRV分离株间的保守性均较高.本研究首次制备了 NDRV σB蛋白的MAb,并鉴定了其抗原表位及该表位的保守性,为NDRV检测方法和表位标记疫苗的研究奠定基础.
- 相关文献
[1]鸭坦布苏病毒E蛋白线性化B细胞抗原表位的鉴定. 张琳,余斌,倪征,陈柳,云涛,叶伟成,华炯钢,崔言顺,张存. 2017
[2]新型鸭呼肠孤病毒σC蛋白单克隆抗体的制备及其抗原表位鉴定. 华炯钢,叶伟成,倪征,陈柳,朱寅初,云涛,张存. 2021
[3]新型鸭呼肠孤病毒一步法TaqMan-MGB荧光定量RT-PCR检测方法的建立与应用. 云涛,华炯钢,叶伟成,倪征,陈柳,张存. 2020
[4]兔出血症病毒VP60蛋白单克隆抗体的制备及鉴定. 魏威,余斌,倪征,陈柳,云涛. 2009
[5]抗猪口蹄疫病毒单克隆抗体的研制及其生物学特性鉴定. 何永强,杜青云,盛祖恬. 2002
[6]猪传染性胃肠炎病毒N蛋白单克隆抗体的制备及鉴定. 王赛,苏菲,袁秀芳,徐丽华,李军星,余兴龙. 2018
[7]重组猪干扰素-α单克隆抗体的制备和鉴定. 周晓丽,袁秀芳,杜晓莉,李军星,徐丽华,王一成. 2015
[8]水稻细菌性条斑病病原菌(Xanthomonas campestris pv.oryzicola)单克隆抗体的研究. 秦文胜,张永平,李德葆,李洸. 1990
[9]猪胸膜肺炎放线杆菌apx Ⅳ表达蛋白单克隆抗体的制备. 袁秀芳,徐丽华,王一成,张存,叶伟成. 2008
[10]抗兔出血症病毒抗体的抗独特型抗体的杂交瘤细胞的建立(英文). 盛祖恬,周明龙,唐建东,肖振国,杜念兴,杜青云,何秉耀. 1995
[11]大肠杆菌LTb蛋白单克隆抗体的制备和鉴定. 刘焕,王一成,袁秀芳,徐丽华. 2008
[12]抗猪口蹄疫病毒单克隆抗体的抗原识别位点分析. 何永强,盛祖恬,杜青云,倪征. 2003
[13]兔多杀性巴氏杆菌外膜蛋白A(OmpA)重组蛋白单克隆抗体的制备及潜在应用. 刘燕,庞安娜,韦强,肖琛闻,鲍国连,季权安,钱微. 2012
[14]鹅细小病毒VP2蛋白单克隆抗体的研制及鉴定. 陈柳,倪征,华炯钢,叶伟成,云涛,朱寅初,张存. 2022
[15]猪胸膜肺炎放线杆菌apxⅣ表达蛋白单克隆抗体的制备. 袁秀芳,王一成,徐丽华. 2007
作者其他论文 更多>>
-
1株伪狂犬病病毒的基因变异及其对小鼠的致病性分析
作者:倪征;叶伟成;陈柳;云涛;华炯钢;朱寅初;张存
关键词:伪狂犬病病毒;变异株;遗传变异;致病性
-
鹅星状病毒基因Ⅰ型和Ⅱ型双重荧光定量RT-PCR检测方法的建立与应用
作者:王宏宇;朱寅初;云涛;张存;鲍恩东
关键词:鹅星状病毒Ⅰ型;鹅星状病毒Ⅱ型;双重荧光定量RT-PCR;TaqMan探针
-
基于智能环境监测的蛋鸭环保型网床养殖圈舍设计及应用
作者:倪征;陈柳;云涛;叶伟成;华炯钢;朱寅初;张存
关键词:蛋鸭;智能环境监测;网床;旱养技术
-
鸭疫里默氏杆菌耐药现状及耐药机制研究进展
作者:关椿久;朱寅初;郑雪;杨华;叶宏伟;刘璨颖;唐标
关键词:鸭疫里默氏杆菌;流行;耐药性;耐药基因
-
家畜布鲁氏杆菌病凝集试验改进与应用
作者:麻秋霞;倪征;张存;刘奇鑫;王耀邦
关键词:布鲁氏杆菌病;试管凝集试验;微量凝集试验;比浊对照法;酶标仪读数法
-
不同鸭坦布苏病毒病疫苗免疫效果的比较
作者:叶伟成;华炯钢;倪征;云涛;陈柳;朱寅初;张存
关键词:鸭坦布苏病毒弱毒疫苗;鸭坦布苏病毒灭活疫苗;抗体测定;抗体消长变化
-
浙江地区鹅星状病毒分离鉴定及其衣壳蛋白多克隆抗体的制备
作者:朱寅初;王宏宇;云涛;华炯钢;叶伟成;倪征;陈柳;张存
关键词:鹅星状病毒;分离鉴定;衣壳蛋白;原核表达;多克隆抗体