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猪传染性胃肠炎病毒TaqMan实时荧光定量PCR检测方法的建立与应用

文献类型: 中文期刊

作者: 张羽欣 1 ; 王树茂 2 ; 段宏勇 2 ; 赵款 3 ; 董世山 3 ; 高飞 2 ; 李丽薇 2 ;

作者机构: 1.河北农业大学动物医学院

2.中国农业科学院上海兽医研究所

3.河北农业大学

关键词: 猪传染性胃肠炎病毒;N基因;荧光定量PCR;TaqMan

期刊名称: 中国兽医科学

ISSN: 1673-4696

年卷期: 2024 年 004 期

页码: 479-484

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 本研究针对猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)的N基因保守序列设计特异性引物和探针,构建重组质粒,建立针对TGEV N基因的Taq Man荧光定量PCR检测方法,用于临床快速诊断和实验室检测。结果显示,该方法特异性好,与其他具有相似临床症状的猪源病毒相比,不存在交叉反应,Ct值在1×10~9~1×10~1copies/μL的范围内具有很好的线性关系,R ~2=0.99。该方法最低检测限为10 copies/μL,标准曲线为y=-3.058 7x+37.7,斜率为-3.058 7。该方法重复性好、敏感度高、特异性强,适用于临床样品中TGEV抗原核酸的检测和实验室病毒生长特性的研究,为准确定量及诊断TGEV提供了有效的试验手段和检测工具。

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