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禽流感病毒通用型RT-LAMP快速检测方法的建立

文献类型: 中文期刊

作者: 石霖 1 ; 王秀荣 2 ; 孙阮洋 1 ; 李雁冰 2 ; 程荣华 3 ; 于学武 4 ; 曹东 4 ; 薛树山 4 ; 赵培 4 ;

作者机构: 1.东北农业大学动物医学学院

2.中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/农业部动物流感重点开放实验室

3.吉林省畜牧兽医科学研究院

4.辽宁省动物疫病预防控制中心

关键词: 禽流感;RT-LAMP;诊断方法

期刊名称: 中国预防兽医学报

ISSN: 1008-0589

年卷期: 2015 年 37 卷 05 期

页码: 383-386

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 为建立一种禽流感病毒(AIV)的快速检测方法,本研究根据环介导等温扩增技术(LAMP)原理,设计了针对AIV M基因4个不同区段的特异性引物,并对反应条件和反应体系进行优化,建立了AIV的RT-LAMP方法。结果表明,该方法对AIV H1~H16亚型的检测结果均为阳性,而对其他禽类病毒的扩增均为阴性,具有良好的特异性。对AIV的最低检测限为13.43 EID50/m L,灵敏度为普通一步RT-PCR的10倍;扩增反应可以在恒温水浴内60 min内完成;在反应体系中添加荧光染料后,肉眼即可判定检测结果。该检测方法与RT-PCR方法和荧光定量RT-PCR方法对临床样品检测的符合率均为81.8%。该方法能够简便、快速、灵敏、特异地检测AIV。

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