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镰形扇头蜱肌钙蛋白Ⅰ基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达

文献类型: 中文期刊

作者: 马腾 1 ; 周金林 1 ; 周勇志 1 ; 向飞宇 1 ; 柴国祚 1 ; 沈杰 1 ;

作者机构: 1.中国农业科学院上海兽医研究所/农业部动物寄生虫学重点开放实验室

关键词: 镰形扇头蜱;肌钙蛋白Ⅰ;克隆;表达

期刊名称: 中国兽医寄生虫病

ISSN: 1005-0868

年卷期: 2007 年 15 卷 03 期

页码: 7-11

摘要: 目的克隆镰形扇头蜱肌钙蛋白Ⅰ(TnI)的cDNA并进行表达及鉴定。方法用RT-PCR方法从镰形扇头蜱总RNA中克隆编码肌钙蛋白Ⅰ的cDNA片段,将该cDNA连接到pET-32a(+)表达载体,并转入宿主菌BL21(DE3),经IPTG诱导表达,并对表达产物进行Western blot分析。结果获得镰形扇头蜱的eDNA,并在大肠杆菌中以包含体的形式高效表达,Westem blot分析表明,抗TnI重组蛋白兔血清可以识别蜱体内的TnI,并在22 kDa和36 kDa之间有两条带。结论蜱体内可能同时存在两个大小不等的TnI,为进一步的研究打下基础。

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