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红花SCoT-PCR反应体系的建立与优化

文献类型: 中文期刊

作者: 刘新梅 1 ; 梁慧珍 2 ; 许兰杰 2 ; 余永亮 2 ; 杨红旗 2 ; 谭政委 2 ; 董薇 2 ; 李磊 2 ; 肖爱利 3 ;

作者机构: 1.郑州大学生命科学学院

2.河南省农业科学院芝麻研究中心

3.河南省农业技术推广总站

关键词: SCoT;体系优化;红花(Carthamus tinctorius)

期刊名称: 分子植物育种

ISSN: 1672-416X

年卷期: 2022 年 20 卷 003 期

页码: 895-901

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 为构建红花最佳扩增体系,为以后研究红花遗传多样性和目的基因标记提供了科学依据.本研究采用L16(45)正交试验和单因素试验相结合的方法对红花SCoT-PCR反应体系中的引物,DNA、dNTPs、PCR Buffer(含Mg2+),Taq DNA聚合酶进行优化,每个因素都设为四水平.结果表明,五个影响因素中dNTPs的影响最大,红花最佳反应体系为引物0.6 mmol/L,DNA60 ng,dNTPs 0.25 mmol/L,Taq DNA聚合酶1.5 U,PCR Buffer(含Mg2+)2 μL,ddH2O补足至20 μL.选用引物S15对八种红花资源对扩增体系进行验证,结果显示扩增条带清晰,多态性好,表明该体系适合红花分子标记研究.

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