文献类型： 中文期刊

作者： 吴学敏 ¹ ; 陈如敬 ¹ ; 陈秋勇 ¹ ; 车勇良 ¹ ; 严山 ¹ ; 刘玉涛 ¹ ; 周伦江 ¹ ; 王隆柏 ¹ ;

作者机构： 1.福建省农业科学院畜牧兽医研究所/福建省畜禽疫病防治工程技术研究中心

关键词： 伪狂犬病病毒;gC蛋白;酶联免疫吸附试验

期刊名称： 畜牧兽医学报

ISSN： 0366-6964

年卷期： 2022 年 006 期

页码： 2029-2034

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 本研究旨在建立变异伪狂犬病病毒FJ-2012株gC蛋白抗体间接ELISA检测方法，掌握不同猪场猪群的gC抗体水平情况。将FJ-2012株gC基因连接至pCzn1载体，转染至Arctic express（DE3）感受态细胞，IPTG诱导表达产物经SDS-PAGE和Western blot验证，通过矩阵法试验、临界值的确定、特异性试验、重复性和敏感性试验，建立PRV-gC抗体间接ELISA检测方法，并对源于不同猪场的280份血清进行PRV-gC抗体检测。结果表明，成功表达获得FJ-2012株pCzn1-gC重组蛋白；建立的间接ELISA方法的最佳抗原包被浓度为10μg·mL^-1和最佳样品血清稀释比例为1∶50,阴性和阳性判定的OD_{650 nm}临界值为0.406～0.438,介于之间的判定为可疑；临床检测结果显示，120份盲样猪血清PRV-gC抗体阳性率为91.67%、PRV-gB抗体阳性率为95.00%,两种抗体检测结果的整体符合率为95.83%;PR不稳定的猪场血样PRV-gC抗体阳性率为96.25%（77/80）,而PRV已净化的种猪场血样PRV-gC抗体阳性率为78.75%（63/80）。因此，建立的PRV变异株gC抗体间接ELISA检测方法为临床猪血清抗体检测提供了特异、灵敏和稳定的技术，也为开展变异PRV血清学调查奠定基础。