文献类型： 中文期刊
作者： 刘晏辰 1 ; 周世莹 2 ; 张洋 2 ; 高扬 2 ; 关伟军 1 ;
作者机构： 1.中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
2.首都体育学院
关键词： 肺间充质干细胞组织;原代培养;诱导分化;检测;多向潜在能力研究
期刊名称： 畜牧兽医学报
ISSN： 0366-6964
年卷期： 2024 年 002 期
页码： 540-551
收录情况： 北大核心 ; CSCD
摘要： 本研究利用荷斯坦牛肺间质干细胞（LR-MSCs）,通过体外试验观察LR-MSCs在不同条件下的成骨分化能力，以期为临床应用及组织工程提供新的种子细胞。本项目以荷斯坦牛（健康荷斯坦牛胎牛，0日龄，1只，雄性）为对象，通过无菌方法获得肺组织，通过组织块贴壁方法获得LR-MSCs,并将其原代培养。通过绘制3代、9代、15代细胞的生长曲线，测定其增殖时间及成体能力。利用RT-PCR技术对干细胞表面标志物（CD29、CD44、CD73、CD90、CD106、CD166、CD34和CD45）的表达进行检测。对该基因进行染色体核型分析，并对其进行遗传转化，观察该基因的多向性。结果显示，这种方法能获得LR-MSCs,它们在体外培养时表现为长梭形和螺旋形，并呈现典型的“S”曲线。第9世代的倍增时间比15世代的短，但比3世代的长（P＜0.01）;第9代LR-MSCs的成株率较3代明显降低，而15代较高，差异有统计学意义（P＜0.05）。应用RT-PCR技术检测到在LR-MSCs中特异表达的CD29、CD44、CD73、CD90。前期研究发现，LR-MSCs可特异性地表达CD29、CD44、CD73、CD90、CD106、CD166,而CD34、CD45则不表达。对LR-MSCs进行染色体组测序，发现其为正常二倍体（2n=60,XY）。通过对荷斯坦牛LR-MSCs的免疫荧光染色及RT-PCR分析，证明LR-MSCs具有向脂肪、骨、软骨等多种细胞定向分化的能力。这可能为今后的组织工程研究提供了一种新的种子细胞。
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