文献类型： 中文期刊

作者： 王熙凤 ¹ ; 孟庆玲 ² ; 乔军 ² ; 陈英 ² ; 钟文强 ² ; 贡莎莎 ² ; 黄运福 ² ; 才学鹏 ³ ;

作者机构： 1.石河子大学动物科技学院;中国农业科学院兰州兽医研究所

2.;石河子大学动物科技学院;中国农业科学院兰州兽医研究所

3.;石河子大学动物科技学院;中国农业科学院兰州兽医研究所;

关键词： 肝片吸虫;铁蛋白样蛋白;分子特征;抗原性

期刊名称： 河南农业科学

ISSN： 1004-3268

年卷期： 2018 年 02 期

页码： 119-124

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为研究肝片吸虫Ftn-1蛋白的免疫学特性,根据Gen Bank中已发表的Ftn-1基因序列设计特异性引物,以肝片吸虫总RNA为模板,进行Ftn-1基因的RT-PCR扩增,将扩增产物连接到p MD19-T载体中,筛选出阳性克隆后测序,分析其分子特征。将Ftn-1基因克隆入表达载体p ET-32a(+)中,将其转化至感受态细胞E.coli BL21(DE3)中,IPTG诱导表达并获得纯化的重组蛋白Ftn-1,经SDS-PAGE检测后,进行Western blot和小鼠免疫试验,分析其抗原性。结果显示,成功克隆了肝片吸虫Ftn-1基因,其c DNA全长为477 bp,推测编码158个氨基酸,编码蛋白质分子的抗原表位区主要集中在第33—57、83—87、113—146位,为亲水性蛋白,无跨膜区和信号肽。经SDS-PAGE检测,重组蛋白Ftn-1分子质量约为33.5 ku,与预期大小相符;Western blot分析结果表明,重组蛋白Ftn-1可被肝片吸虫阳性血清特异性识别,证明具有良好的反应原性。小鼠免疫试验证实,重组蛋白Ftn-1具有良好的免疫原性。