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猪带绦虫丝氨酸蛋白酶抑制分子Ts-serpin-2对人THP-1细胞炎性细胞因子的表达影响

文献类型： 中文期刊

作者： 毕研丽 1 ; 刘仲藜 2 ; 郭爱疆 1 ; 张少华 1 ; 王帅 1 ; 才学鹏 2 ;

作者机构： 1.家畜疫病病原生物学国家重点实验室

2.中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室

关键词： 猪带绦虫;丝氨酸蛋白酶抑制分子;真核表达;THP-1细胞;炎性细胞因子

期刊名称： 中国动物传染病学报

ISSN： 1674-6422

年卷期： 2023 年 001 期

页码： 16-25

收录情况： 北大核心

摘要： 为了深入研究猪带绦虫丝氨酸蛋白酶抑制分子（Ts-serpin-2）对THP-1细胞炎性细胞因子分泌的调节作用，本实验通过RTPCR从猪带绦虫成虫扩增获得Ts-serpin-2（Ts M＿000807300）的编码序列CDS，利用毕赤酵母表达Ts-serpin-2重组蛋白。利用发色底物特异性反应检测Ts-serpin-2蛋白对猪胰蛋白酶、胰弹性蛋白酶、牛α-糜蛋白酶、猪胃蛋白酶、木瓜酶、凝血酶和组织蛋白酶G的抑制效果。重组蛋白Ts-serpin-2处理THP-1细胞24 h，应用q RT-PCR和ELISA方法检测各炎性细胞因子差异表达水平。结果显示，真核酵母表达的重组蛋白Ts-serpin-2分子量约为48 kDa，具有蛋白酶抑制活性，对牛α-糜蛋白酶、猪胰弹性蛋白酶及猪胰蛋白酶的活性均有明显的抑制作用。重组蛋白Ts-serpin-2可抑制LPS活化的THP-1细胞促炎性细胞因子IL-1β、IL-6、IL-12α、IFN-γ和i NOS2m RNA的转录水平，促进IL-4刺激的THP-1细胞抗炎性细胞因子IL-10的表达。ELISA结果显示，Ts-serpin-2能够抑制巨噬细胞分泌致炎因子TNF-α、IL-6和IFN-γ，刺激IL-10的分泌，与q RT-PCR检测结果基本一致。上述研究结果表明猪带绦虫Ts-serpin-2可通过调节宿主巨噬细胞分泌的炎性因子影响虫体入侵过程中宿主的免疫应答。

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