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携带荧光蛋白UnaG的口蹄疫病毒复制子系统的构建及其鉴定

文献类型： 中文期刊

作者： 李雪彤 1 ; 黄园园 1 ; 郭祥龙 1 ; 张韵 1 ; 孙世琪 1 ; 郭慧琛 1 ; 吴金恩 1 ;

作者机构： 1.中国农业科学院兰州兽医研究所兰州大学动物医学与生物安全学院动物疫病防控全国重点实验室

关键词： UnaG;口蹄疫病毒;复制子

期刊名称： 中国兽医学报

ISSN： 1005-4545

年卷期： 2025 年 45 卷 007 期

页码： 1411-1416,1436

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为构建携带荧光蛋白(UnaG)的口蹄疫病毒(foot-and-mouth disease virus, FMDV)亚基因组复制子系统，本研究以FMDV全长cDNA质粒为模板，通过双酶切去除FMDV的部分结构蛋白和非结构蛋白，应用表达绿色荧光蛋白UnaG的报告基因序列替换FMDV的部分结构蛋白基因序列，成功构建FMDV-UnaG复制子。经PCR和测序验证后，将线性化的FMDV-UnaG复制子转染至表达T7 RNA聚合酶的BSR/T7细胞，并采用荧光显微镜和激光共聚焦技术观测荧光信号。结果表明，构建的FMDV-UnaG复制子能够有效表达UnaG蛋白且该蛋白与FMDV的3A蛋白存在共定位现象。此外，通过Western blot和RT-qPCR也分别检测到该复制子RNA可以表达病毒的非结构蛋白并且在BSR/T7细胞中能够进行自主复制。总之，FMDV-UnaG亚基因组复制子的成功构建为后续深入研究FMDV的复制和翻译机制及发展疫苗载体等提供了有利工具。

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