文献类型: 中文期刊
作者: 张昆 1 ; 杨顺利 1 ; 许笑 1 ; 熊铃 1 ; 曲自刚 1 ; 汪靖 1 ; 蔡建平 1 ;
作者机构: 1.中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室
关键词: 胞内劳森菌;重组LI0710蛋白;原核表达;免疫活性
期刊名称: 中国兽医科学
ISSN:
年卷期: 2021 年 009 期
页码: 1148-1154
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: 为了评价胞内劳森菌(Lawsonia intracellularis)鞭毛相关蛋白LI0710的免疫原性,将LI0710基因插入到pET-32a(+)原核表达载体,构建重组表达质粒pET-32a-LI0710,并转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中,经IPTG诱导目的蛋白表达,获得重组目的蛋白(rLI0710),通过Western-blot验证rLI0710的反应原性,同时用rLI0710免疫新西兰大白兔,获得多克隆抗体,用间接ELISA和间接免疫荧光(IFA)方法验证rLI0710的免疫原性。结果显示,重组LI0710蛋白在大肠杆菌中以包涵体形式表达;Western-blot揭示rLI-0710能够与LI试验感染小鼠血清反应,表明rLI0710具有反应原性;ELISA检测表明,rLI0710能诱导家兔产生高效价抗体,且IFA分析表明此抗体能与培养细胞中的LI反应,证明rLI0710具有良好的反应原性和免疫原性。本试验为基于LI0710蛋白的猪增生性回肠炎免疫学诊断方法的建立奠定了基础。
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