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柑桔黄龙病菌的重组酶聚合酶扩增(RPA)检测

文献类型： 中文期刊

作者： 段玉 1 ; 马志敏 1 ; 许建建 1 ; 宾羽 1 ; 宋震 1 ; 周常勇 1 ;

作者机构： 1.西南大学柑桔研究所

关键词： 柑桔黄龙病;重组酶聚合酶恒温扩增（RPA）;快速检测

期刊名称： 中国南方果树

ISSN： 1007-1431

年卷期： 2021 年 005 期

页码： 11-15,20

收录情况： 北大核心

摘要： 为了建立黄龙病菌的重组酶聚合酶扩增（Recombinase Polymerase Amplification, RPA）快速检测体系,丰富柑桔黄龙病的高效简便检测方法,以黄龙病菌株psy62全基因组中的单拷贝tufB-secE-nusG-rplKAJL-rpoB基因簇序列和5拷贝核糖核苷酸还原酶β亚基基因（nrdB）序列设计并筛选特异性引物,经灵敏度比较和检测特异性验证,建立该病的RPA检测体系,并经PCR、RPA和实时荧光PCR对87份柑桔样品的黄龙病菌进行对比检测,验证RPA检测体系的适用性。结果表明,建立的黄龙病菌RPA检测方法能特异性检测柑桔黄龙病;灵敏度与实时荧光PCR相当,是PCR的100倍;扩增过程只需20 min,大幅提高检测效率;对田间疑似柑桔黄龙病的送检样品检测结果与实时荧光PCR一致,比PCR的检出率高。

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