您好,欢迎访问中国农业科学院 机构知识库!

基于CRISPR/LanCas9的水稻基因编辑系统的开发和优化

文献类型: 中文期刊

作者: 李欣格 1 ; 王美霞 2 ; 王晨阳 2 ; 马桂根 2 ; 周常勇 3 ; 王亚南 1 ; 周焕斌 2 ;

作者机构: 1.河北农业大学植物保护学院

2.中国农业科学院植物保护所植物病虫害综合治理全国重点实验室

3.西南大学柑橘研究所国家柑橘工程研究中心

关键词: CRISPR;LanCas9;SLanCas9;基因编辑;水稻

期刊名称: 生物技术通报

ISSN: 1002-5464

年卷期: 2024 年 40 卷 010 期

页码: 233-242

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: [目的]在水稻中建立CRISPR/LanCas9 和 CRISPR/SLanCas9 基因编辑系统,扩展CRISPR/Cas基因编辑工具箱.[方法]将来自动物乳酸杆菌KCTC 3501 的LanCas9 进行密码子优化,并且进一步通过蛋白融合重组LanCas9 和SpCas9 的活性结构域形成嵌合体SLanCas9,分别构建CRISPR/LanCas9 和CRISPR/SLanCas9 编辑工具;以OsWRKY45、OsCPK4、OsCPK6、OsCPK7、OsMPK8、OsGSK3、OsGSK4为靶基因,在NGG PAM或者NAG PAM设计 20 nt或者 24 nt的sgRNA,通过水稻遗传转化,检测分析其编辑效率.[结果]LanCas9 在水稻中可以识别NGG PAM,结合 20 nt的sgRNA编辑效率更高,对OsWRKY45 基因的编辑效率为 25.00%;融合的SLanCas9 不仅能够识别NGG PAM,在NAG PAM位点也有一定的编辑效率,在不同PAM位点的编辑效率分别可达 100%和 39.58%.此外,SLanCas9 还具有多重基因编辑能力,在NGG PAM位点的多重基因编辑效率高达 74.07%.[结论]开发了具有自主知识产权的新型CRISPR/LanCas9 和CRISPR/SLanCas9 基因编辑技术.

  • 相关文献

[1]RUBY辅助的水稻高效CRISPR基因编辑. 邓 美壁,严 浪,詹 志田,朱 敏,和 玉兵. 2025

[2]基因编辑技术及其在作物育种中的应用与安全管理. 薛满德,龙艳,裴新梧. 2018

[3]CRISPR相关技术在肉牛领域的研究进展. 吴天弋,党靖宇,王添祯,张路培,高雪,李俊雅,徐凌洋. 2023

[4]植物线粒体基因组编辑研究进展. 张硕,阚俊虎,周家伟,武志强. 2024

[5]水稻CRISPR/Cas12a系统的优化及其介导的腺嘌呤碱基编辑器的建立. 王敬文,严芳,柳浪,周雪平,王道文,周焕斌. 2021

[6]基于CRISPR/CasX介导的水稻基因组编辑技术的建立. 李雪琪,张素杰,于曼,黄金光,周焕斌. 2023

[7]利用CRISPR/Cas9系统定向改良水稻粒长和穗粒数性状. 沈兰,李健,付亚萍,王俊杰,华宇峰. 2017

[8]CRISPR/Cas9技术编辑淀粉合成基因PUL. 奉宝兵,魏祥进,焦桂爱,胡时开,邬亚文,谢黎虹,圣忠华,邵高能,唐绍清. 2019

[9]Cas9蛋白变体VQR高效识别水稻NGAC前间区序列邻近基序. 辛高伟,胡熙璕,王克剑,王兴春. 2018

[10]利用CRISPR/Cas9技术编辑OsOFP30基因创制水稻粒型突变体. 何勇,刘耀威,熊翔,祝丹晨,王爱群,马拉娜,王廷宝,张健,李建雄,田志宏. 2024

[11]CRISPR/Cas基因编辑技术在水稻育种中的研究进展. 李可,吴传银,隋毅. 2025

[12]利用CRISPR/Cas9技术创制糯稻种质. 陈峰,姜艳芳,焦晓真,张华,朱文银,姜明松,徐建第. 2023

[13]Fatty acid synthase knockout impairs early embryonic development via induction of endoplasmic reticulum stress in pigs. Guo, Jing,Niu, Ying-Jie,Shin, Kyung-Tae,Kwon, Jeong-Woo,Kim, Nam-Hyung,Cui, Xiang-Shun,Guo, Jing. 2018

[14]CRISPR editing in biological and biomedical investigation. Huang, Jiaojiao,Zhao, Jianguo,Wang, Yanfang,Zhao, Jianguo. 2018

[15]Engineering canker-resistant plants through CRISPR/Cas9-targeted editing of the susceptibility gene CsLOB1 promoter in citrus. Peng, Aihong,Chen, Shanchun,Lei, Tiangang,Xu, Lanzhen,He, Yongrui,Yao, Lixiao,Zou, Xiuping,Peng, Aihong,Chen, Shanchun,Lei, Tiangang,Xu, Lanzhen,He, Yongrui,Yao, Lixiao,Zou, Xiuping,Peng, Aihong,Chen, Shanchun,Lei, Tiangang,Xu, Lanzhen,He, Yongrui,Wu, Liu,Yao, Lixiao,Zou, Xiuping. 2017

[16]运用CRISPR/Cas系统对植物基因组进行定点编辑. 宋时奎,王影,于洋,耿立召,张春翔,李相敢,韩天富. 2014

[17]基于CRISPR系统的基因编辑技术的研究进展. 郑基坛,闫娜娜,左二伟. 2021

[18]保加利亚乳杆菌CRISPR位点的序列分析. 程娜,蔡针华,吕加平,贾震虎,逄晓阳. 2018

[19]基于专利文献的全球CRISPR技术研发进展分析与展望. 王友华,邹婉侬,张熠,樊君丽,孙国庆. 2018

[20]利用CRISPR技术鉴定拟南芥miR171a的功能. 黄格格,张静文,张天豹,柯智,翟楠鑫,龙艳,袁潜华,裴新梧. 2019

作者其他论文 更多>>