文献类型： 中文期刊

作者： 张洁 ¹ ; 崔鹏飞 ² ; 张元成 ² ; 邢鑫 ² ; 王丛丛 ² ; 颜成 ² ; 王燕 ² ; 陈源 ² ; 朱春成 ¹ ; 缪葭皓 ² ; 陈素娟 ¹ ; 邓国华 ² ; 陈化兰 ² ;

作者机构： 1.扬州大学兽医学院

2.中国农业科学院哈尔滨兽医研究所

关键词： 禽流感病毒;杆状病毒表达系统;N1蛋白;血清抗体

期刊名称： 中国家禽

ISSN： 1004-6364

年卷期： 2024 年 46 卷 011 期

页码： 40-44

收录情况： 北大核心

摘要： 研究旨在利用昆虫细胞-杆状病毒表达系统制备H5N1亚型禽流感病毒（AIV）的神经氨酸酶（NA）蛋白。试验为获得具有良好反应原性的NA蛋白，将H5N1亚型AIV(DK/YN/S4469/2022)密码子优化后的N1基因插入载体pFastBac1，构建的重组转移载体pFastBac1-N1转化至DH10Bac感受态细胞，经过蓝白斑筛选获得阳性重组杆粒rBacmid-N1，然后将重组杆粒转染至sf9昆虫细胞，获得N1亚型重组杆状病毒。结果显示：N1重组蛋白在sf9昆虫细胞中正确表达，并且该重组蛋白具有良好的反应原性，能够与N1蛋白单克隆抗体3F3发生特异性反应，其仅能识别N1亚型鸡血清，特异性较好。研究成功制备了N1重组蛋白，为NA蛋白表达方法提供参考并为临床血清样品的N1抗体检测方法的建立奠定基础。